人参活性成分Rg3通过CASP8诱导胆管癌细胞凋亡作用研究r——基于网络药理学筛选及实验验证

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目的:通过网络药理学方法筛选人参活性成分治疗胆管癌的潜在靶点并进行初步实验验证.方法:使用OMIM和Gene Cards数据库收集胆管癌靶基因;TCMSP数据库查询人参的活性成分和靶标,并经UniProt进行基因注释.经Venn工具获取胆管癌和人参交集基因后导入STRING数据库构建PPI网络.GEPIA数据库进行基因表达验证和生存分析.通过docking筛选与Rg3相互作用的分子,通过CCK-8实验考察给与Rg3对Hucct-1细胞增殖作用,通过Annexin V和PI染色观察细胞凋亡.通过WB验证筛选基因靶点的异常表达.结果:疾病基因共1733个,人参活性化合物共14个,靶基因52个,两者交集基因24个,STRING得到核心基因20个,其中有11个在正常组织和肺癌组织中的表达有显著性差异,11个基因中有2个的总体生存率显著改变.通过分子对接,以人参活性成分Rg3为小分子,考察与ALOX5和CASP8作用情况,发现Rg3可与CASP8发生显著的相互作用.给与Rg3可以显著抑制Hucct-1细胞,诱导Hucct-1细胞凋亡,上调CASP8,Bax表达,抑制Bcl-2表达.结论:CASP8在胆管癌组织中高表达、总体生存率显著改变,是人参治疗胆管癌的核心基因,或可成为胆管癌的诊断和治疗靶点.人参活性成分Rg3可以通过上调CASP8诱导凋亡发挥对胆管癌的治疗作用.
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