【摘 要】
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目的 探讨Cyclins/CDKs在Fas介导的细胞凋亡过程中的作用机制.方法 以白血病细胞株(Molt-4和Jurkat细胞株)和健康人的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导稳定而又典型
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目的 探讨Cyclins/CDKs在Fas介导的细胞凋亡过程中的作用机制.方法 以白血病细胞株(Molt-4和Jurkat细胞株)和健康人的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导稳定而又典型的细胞周期特异性凋亡模型;用Cyclin/DNA双参数流式细胞术检测Cyclins的表达;用Western blot法检测CDK1和CDK2的磷酸化位点以及进一步确认Cyclins的表达.结果 研究rhFasL诱导Jurkat、Molt-4细胞和进入细胞周期的PBL凋亡时,G1期的Cyclin D3在发生凋亡效应前明显升高、发生凋亡效应后明显下降,而Cyclin E则先明显下降后升高,Cyclin A和B1无明显变化;CDK2 Thr-160位点的磷酸化水平在发生凋亡效应前后均明显下降,CDK1 Thr-161、Tyr-15位点的磷酸化水平在发生凋亡效应后稍有下降;G0期淋巴细胞则不能被诱导出明显的细胞凋亡.结论 Fas介导的细胞凋亡的发生与细胞是否通过限制点进入细胞周期有关,细胞凋亡发生于晚G1期时G1期Cyclin E的表达下降以至不能磷酸化或者磷酸化CDK2不全,在检测点的监督下DNA受损的细胞不能通过G1/S交界进入S期而发生细胞凋亡.在凋亡发生后期Cyclins/CDK的变化与细胞被阻滞在G1期有关.
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