牛乳铁蛋白直接竞争ELISA检测法的建立

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[目的]建立一种检测牛乳铁蛋白(LF)含量的竞争ELISA检测方法。[方法]制备鼠抗牛LF单克隆抗体,采用直接竞争ELISA测定酶标记物效价,建立牛LF的直接竞争ELISA检测方法。[结果]纯化后,制备的鼠抗牛LF单抗效价达1:1280000,且鉴定为IgGl。该单抗对牛乳铁蛋白具有很强的特异性。制备酶标单抗的效价为1:640000。抗原包被物和酶标单抗的最适工作浓度分别为1.0μg/ml和1:40000。抗原用碳酸盐缓冲液(pH值为9.6)包被先在4℃过夜、再37℃放置2h的效果最好。采用2%牛血清白蛋
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