悬浮法及酶消化法分离培养脂肪干细胞

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目的:了解脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)的获取及原代培养方法,明确体外定向分化条件,为进一步ADSCs移植实验提供基础.方法:取6周龄雄性大鼠,脱颈处死,在无菌条件下取大鼠腹股沟处脂肪组织,放入装有PBS的培养皿中,剔除肉眼可见的血管及筋膜,分别用酶消化法及悬浮组织块法培养、传代及鉴定,并比对两种方案的优缺势.结果:悬浮法和酶消化法培养得到的大鼠ADSCs形态均为梭形纤维样,生长迅速,生长曲线为典型的“S”形,两种方法获得的ADSCs经成骨诱导培养3周后茜素红染色均为阳性,成脂诱导培养3周后,油红染色也均为阳性.结论:大鼠提取的脂肪组织经两种培养方法均可定向诱导分化为ADSCs,并可稳定增殖传代,但悬浮法较酶消化法更便利,价格更低廉.
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