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目的
研究抑制MDC1基因的蛋白表达对裸鼠移植瘤的影响，观察裸鼠肿瘤病理组织学和细胞生物学特征的变化。
方法根据MDC1 mRNA序列，设计合成3对有效的干扰序列和阴性对照序列，并与载体pSIH1-H1-copGFP形成重组质粒，RT-PCR和蛋白印迹法测定MDC1 mRNA和蛋白表达水平，筛选出阴性转染组(ECA109-N)、MDC1转染组(ECA109-M)细胞，将其接种裸鼠分为ECA109-M、ECA109-N、ECA109组，上述各组又分为60Co γ射线照射组和未照射组。观察各组裸鼠移植瘤照射后体积变化，蛋白印迹法检测移植瘤组织中CHK1、CHK2、CHK2T68表达水平，流式细胞仪分析裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和细胞凋亡情况。多组样本均数间的比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验。
结果成功构建pMDC1-shRNA质粒并转染ECA109细胞，获得稳定转染细胞ECA109-M。所有接种裸鼠均成活并在接种后1周左右可见裸鼠爪下形成移植瘤，各组之间肿瘤大小相近(P>0.05)。15 Gy照射后单纯照射组和空载照射组裸鼠的肿瘤生长速度慢于未照射组(P<0.05)，其中MDC1转染联合照射组较阴性对照组和空白组肿瘤相对生长速率降低(P<0.05)，生长抑制率升高(P<0.05)。MDC1转染联合照射组q值为1.36。MDC1转染联合照射组裸鼠体内CHK1和CHK2的蛋白表达水平相近(P>0.05)，但CHK2T68磷酸化水平明显降低(P<0.05)，各组裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和凋亡细胞比例也相近(P>0.05)。
结论RNA干扰降低MDC1蛋白表达后可有效增强细胞的放射敏感性，表现为抑制了60Co γ射线照射后裸鼠移植瘤的生长速度。