酪氨酸酶相关蛋白—1的基因克隆表达及纯化

来源 :中国皮肤性病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hanson1023

【摘要】

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目的克隆TRP-1编码基因,表达并纯化TRP-1蛋白.方法通过RT-PCR方法扩增TRP-1编码基因,克隆至pUC19载体并测序,再亚克隆至GST融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达

【作者】

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李春英高天文刘玉峰

【机构】

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第四军医大学西京医院皮肤科

【出处】

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中国皮肤性病学杂志

【发表日期】

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2001年6期

【关键词】

：

TRP-1 克隆融合表达恶性黑素瘤白癜风 TRP1 Clone Fusion expression Melanoma Vitiligo

【基金项目】

：

教育部留学回国人员科研启动基金

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目的克隆TRP-1编码基因,表达并纯化TRP-1蛋白.方法通过RT-PCR方法扩增TRP-1编码基因,克隆至pUC19载体并测序,再亚克隆至GST融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达TRP-1/GST融合蛋白,分析鉴定表达蛋白的可溶性,并用谷氨酰胺树脂柱纯化表达的蛋白.结果①从培养的人黑素细胞中扩增出编码TRP-1的cDNA序列,序列测定证实与文献报道的序列一致;②成功构建了GST融合表达载体pGEX-4T-1/TRP-1;③表达了TRP-1/GST融合蛋白;④得到纯化的TRP-

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