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摘要 [目的]探讨日粮中添加维生素C对长毛兔夏季热应激的缓解效果。[方法]选择80只10月龄长毛兔随机分成5组，分别为对照组、试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，在夏季高温条件下在基础日粮中分别添加0、500、1 000、1 500和2 000 mg/kg维生素C粉，研究维生素C对缓解长毛兔热应激效果的作用。[结果]夏季长毛兔基础日粮中添加维生素C可以有效提高单次产毛量。日粮中添加维生素C对长毛兔血清中葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇及高密度脂蛋白的影响较小，对全血中白细胞（WBC）、中值细胞（MID）、嗜中性粒细胞（GRN）和红细胞（RBC）数量的影响较大。从经济成本等综合考虑，为缓解夏季热应激，长毛兔基础日粮中维生素C的适宜添加量为1 000 mg/kg。[结论]夏季高温时，在长毛兔日粮中添加维生素C能有效缓解长毛兔的热应激效应。
关键词 长毛兔；热应激；维生素C；生产性能；生化指标
中图分类号S829 文献标识码 A 文章编号0517-6611（2016）35-0129-04
Effects of Adding Vitamin C in the Diet on Angora Rabbits under Heat Stress
GU Jian
（Laian Branch of Agricultural Broadcasting and Television School of Anhui Province，Laian，Anhui 239200） Abstract[Objective] To discuss the alleviating effect of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits in summer. [Method] 80 10-month-old Angora rabbits were selected and randomly divided into 5 groups： control group， experiment group Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ. Under the conditions of high temperature in summer， 0， 500， 1 000， 1 500， 2 000 mg/kg vitamin C powder were added in the basal diet in control group， experiment group Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ， Ⅳ respectively. The alleviating effects of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits were studied. [Result] Wool yield of each time of Angora rabbits could be increased by adding vitamin C in the basal diet in summer. Adding vitamin C had small effects on glucose， alanine aminatransferase（ALT）， aspartate aminotransferase（AST）， triglyceride（TG）， total cholesterol（TC） and high-density lipoprotein（HDL） in the serum of Angora rabbits， but it had greater effects on the count of white blood cell（WBC）， middle cells （MID）， neutrophilic granulocyte（GRN） and red blood cells（RBC）.Considering the cost and other factors， the suitable adding amount of vitamin C in the basal diet of Angora rabbits was 1 000 mg/kg for alleviating the heat stress in summer. [Conclusion] Under high temperature conditions in summer， the heat stress of Angora rabbits could be alleviated by adding vitamin C in the basal diet.
Key wordsAngora rabbits；Heat stress；Vitamin C；Production performance；Biochemical indices
長毛兔被毛浓密，体表没有汗腺，散热困难，在我国南方地区夏季长时间高温易引起长毛兔发生热应激综合征，主要表现在长毛兔采食量降低、生长速度缓慢、饲料转化率下降、死亡率升高，严重影响养殖户及企业的经济效益[1]。为了减缓长毛兔的热应激反应，降低高温季节长毛兔养殖业的损失，利用抗热应激药物是一种简便快捷的方法。目前，关于抗热应激研究报道较多的是家禽和生猪等，对长毛兔的抗热应激研究相对较少。抗热应激药物的研究主要集中在维生素、电解质、矿物元素、酸化剂和中草药等。笔者通过在长毛兔日粮中添加维生素C，探讨不同维生素C水平对热应激状态下长毛兔的生产性能及血液生化指标的影响，旨在为夏季长毛兔生产和抗热应激研究提供基础数据。
1材料与方法
1.1试验材料
维生素C粉购自杭州民生生物技术有限公司，耐高温，纯度95%；SOD、MDA、T-AOC等试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 1.2试验动物及其分组
体重、产毛量基本一致的10月龄长毛兔80只随机分成5组：对照组、试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。每组16只，公母各半。对照组饲喂基础日粮，试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在基础日粮中分别添加500、1 000、1 500和2 000 mg/kg维生素C粉。
1.3日粮配方
日粮为直径5 mm、长10～15 mm的颗粒饲料，具体日粮组成如下：
花生秧39.0%、豆粕13.0%、玉米14.0%、麸皮22.0%、长毛兔专用预混料4.0%、葡萄糖粉3.0%、酵母粉3.0%、石粉1.0%、蛋氨酸0.5%、赖氨酸0.3%、甜味剂0.1%、大蒜素0.1%。
1.4饲养管理
试验长毛兔由专人管理，单笼饲养，自由采食，自由饮水。试验期内每天测定兔舍内温度4次，取平均值作为当天温度。
1.5样品的采集与处理
1.5.1兔毛采集。
试验初期（7月10日）剪毛1次，试验期结束（9月25日）时剪毛1次。专人负责兔毛采集，并称重。
1.5.2血液的采集。
在试验正式开始前（6月20日）、最热的试验中期（8月5日）和高温结束的试验末期（9月25日）各耳静脉采血1次。耳静脉采血10 mL，血液分为2份，1份加入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，测定全血各类细胞数；另1份不加抗凝劑，收集血清，-80 ℃下保存测定血清生化指标。
1.5.3血细胞数量的测定。
使用自动血细胞分析仪进行血细胞数量的测定。
1.5.4血清生化指标测定。
送至安徽医科大学第一附属医院血液检测中心测定血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白等血清生化指标。
1.6数据统计与分析
试验数据使用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析和显著性检验，结果均以平均值±标准差表示。
2结果与分析
2.1日粮中添加维生素C对长毛兔产毛量的影响
试验长毛兔于7月10日和9月25日分别进行第1次和第2次剪毛。由表1可知，第1次剪毛时添加维生素C的4个试验组比产毛量对照组有所增加，但各组间差异不显著（P>0.05）。其中，试验组 Ⅱ 产量较高，比对照组提高了8.04%。75 d养毛期结束后第2次剪毛，各试验组单次产毛量均高于对照组，总体呈现出先增加后降低的趋势。其中，试验组 Ⅱ 单次产毛量较高，显著高于对照组和其他试验组（P<0.05），对照组与试验组Ⅰ、试验组Ⅲ、试验组Ⅳ间差异不显著（P>0.05）。与第1次剪毛量相比，试验组Ⅱ产毛量提高了16.53%，差异显著（P<0.05）。
2.2维生素C对长毛兔血清生化指标的影响
分别于6月20日、8月5日和9月25日进行第2次、第3次耳静脉采血，每次采血5 mL，不加抗凝剂，测定血清中葡萄糖、谷丙转氨酶等生化指标。由表2可知，高温热应激显著影响对照组长毛兔血清中的葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇等生化指标的含量（P<0.05），其中血糖含量显著降低（P<0.05），谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇含量显著增加（P<0.05）。9月下旬高温热应激对长毛兔的影响逐步减弱，除葡萄糖、谷草转氨酶以外，对照组长毛兔血清中其他生化指标含量均呈现出递减趋势，但均显著高于第1次采血时（P<0.05），与第2次相比差异不显著（P>0.05）。高密度脂蛋白的含量有所变化，但3次采血间差异不显著（P>0.05）。
从表3可以看出，第1次采血时，对照组及各试验组间血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯等生化指标差异不显著（P>0.05）；试验组Ⅰ、试验组 Ⅱ 的胆固醇和高密度脂蛋白显著高于其他组（P<0.05），但试验组Ⅰ和试验组Ⅱ间差异不显著（P>0.05）。
由表4可知，热应激时在长毛兔日粮中添加维生素C会引起长毛兔血糖葡萄糖含量升高，但试验组Ⅲ长毛兔血糖降低，且显著低于试验组Ⅰ和试验组Ⅳ（P<0.05），其他各组间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，日粮中添加不同剂量的维生素C能引起血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量不同程度增加，但差异不显著（P>0.05）。除试验组Ⅰ 外，甘油三酯、胆固醇含量总体上呈降低趋势，但各组间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，各试验组高密度脂蛋白含量有升高趋势，但差异不显著（P>0.05）。
由表5可知，第3次采血时，各组间生化指标比较接近，没有较大差距，差异不显著（P>0.05）。
综上所述，随着夏季温度由升高到降低，长毛兔的热应激反应也呈先重后轻的趋势。总体来看，血糖在3次采集的血清中呈下降趋势，降幅较为明显，谷丙转氨酶、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白等指标呈现先升高后降低的趋势，谷草转氨酶则始终呈现升高的趋势。其中，高密度脂蛋白受温度、维生素C及其添加量的影响最小，基本处于稳定状态。
2.3维生素C对长毛兔全血各细胞数量的影响
与血清采集同时3次采集试验长毛兔耳静脉血全血添加EDTA抗凝，测定白细胞（WBC）、淋巴细胞（LYM）、中值细胞（MID）、嗜中性粒细胞（GRN）和红细胞（RBC）等细胞数量。从表6可以看出，热应激对长毛兔血液中MID和RBC数量没有显著影响（P>0.05）；第3次采集血液中的WBC和LYM的数量显著增加（P<0.05）；第2次、第3次采集血液中GRN数量显著高于第1次（P<0.05），但第2次和第3次间差异不显著。（P>0.05）
从表7可以看出，在长毛兔日粮中添加维生素C前，与对照组相比，各试验组血液WBC、LYM、MID、GRN和RBC数量没有显著差异，各组间差异也不显著。 第2次采血正处于试验期内夏季最高温阶段，长毛兔处于强度热应激状态，试验组长毛兔饲喂添加维生素C的颗粒饲料45 d，测定各组血液细胞数量。从表8可以看出，随着维生素C添加量的增加，WBC数量呈降低趋势，试验组Ⅲ WBC数量降低最为显著，与对照组和其他试验组差异显著（P<0.05）；试验组Ⅳ WBC数量高于对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ，但差异不显著（P>0.05），但显著高于试验组Ⅲ（P<0.05）。试验组Ⅲ LYM数量显著低于试验组Ⅳ，与对照组和其他试验组间无显著差异。试验组ⅣMID数量显著高于其他各组，对照组与试验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ没有显著变化。GRN数量的变化规律与WBC類似，与其他各组相比，试验组Ⅲ显著降低（P<0.05）。RBC数量的变化最为复杂，对照组和试验组Ⅲ显著低于其他各组（P<0.05），而试验组Ⅲ RBC数量显著低于对照组（P<0.05），试验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ间差异不显著（P>0.05）。
试验第3次采血时间在9月25日，高温已经结束，长毛兔热应激效应逐步缓解，机体机能正缓慢恢复，试验长毛兔血细胞数量也逐步恢复至第1次采血时水平。试验组Ⅰ WBC和LYM数量显著高于其他各组（P<0.05），MID、GRN和RBC数量各组间均无显著差异（P>0.05）（表9）。
综上所述，高温热应激和维生素添加量对血细胞中MID数量的影响较小，各组长毛兔的各次采血间几乎没有变化，基本维持恒定状态。
第2次采血时除试验组Ⅳ外，WBC数量其他组都相应减少，第3次采血时有所增加；各组LYM数量均在第2次采血时下降，而在第3次采血时有所增加；除试验组Ⅲ第2次GRN和RBC数量显著下降外，其他各组GRN和RBC数量均呈增加趋势，但差异不显著。
3讨论
3.1维生素C对热应激长毛兔生产性能的影响
长毛兔汗腺不发达，散热主要通过呼吸、排泄和皮肤辐射，成年兔的最适温度为15～25 ℃，适宜的温度范围为5～30 ℃。当环境温度超过35 ℃时，长毛兔呼吸加快，时间持续较长时，容易发生热应激[1]。
热应激状态下，畜禽机体细胞膜、线粒体等受损伤，蛋白质合成受抑制，引起巨噬细胞功能下降，降低机体抵抗力。维生素C的主要生理功能之一就是维持机体细胞膜的完整性，增强白细胞吞噬功能，提高网状内皮系统功能，增强机体抗热应激能力[2]。高温热应激容易引起畜禽体内维生素C缺乏，造成皮质类固醇量不足，降低了畜禽体温调节能力。畜禽体内类固醇激素有维持机体体温稳定的功能，维生素C对类固醇激素的合成起着重要的作用。因此，畜禽日粮中添加维生素C可以增强畜禽体温调节能力，维持体温基本恒定，减少热应激效应，提高其生产性能[3]。张昌莲等[4]研究表明，在高温热应激状态下在肉种鸭日粮中补充300 mg/kg的维生素C可以有效降低热应激对肉种鸭的危害，增强肉种鸭机体的适应能力，提高肉种鸭的采食量、产蛋量。杨维等[5]对新西兰肉兔的研究表明，在慢性热应激条件下饮水中添加单一或复合电解质（氯化钾、氯化铵和碳酸氢钠）提高了新西兰兔平均日增重，降低了料重比，均有较好的缓解新西兰兔热应激的效果。
该试验结果初步验证了上述理论和部分试验结果，第1次剪毛时添加维生素C的4个试验组产毛量相比对照组均有所增加，但由于维生素C饲喂时间较短，对长毛兔产毛量提高的效果不明显。第2次剪毛时，各试验组产毛量均高于对照组，尤其是试验组 Ⅱ 单次产毛量显著高于对照组和其他试验组。与第1次剪毛量相比，第2次剪毛时试验组Ⅱ产毛量显著提高了16.53%。夏季高温热应激条件下，长毛兔产毛量会出现下降，该试验中第2次剪毛长毛兔产毛量略有增加，主要由于第1次剪毛养毛期为60 d，第2次养毛期为75 d，折算成91 d标准养毛期产毛量，第2次产毛量比第1次产毛量也略有下降，但2次产毛量差异不显著。
3.2维生素C对热应激长毛兔血清生化指标的影响
维生素C参与动物机体内的氧化还原反应，具有解毒作用，可以促进抗体生成，增强肝脏的解毒能力，是目前最常用的抗应激添加剂。热应激时畜禽机体内会产生大量有害物质，而肝脏在有害物质的代谢方面起着极其重要的作用，谷丙转氨酶和谷草转氨酶是衡量肝脏功能的重要指标，血红蛋白、谷草转氨酶和谷丙转氨酶、碱性磷酸酶浓度与热应激程度紧密相关，可作为牛抗热应急指标的基本依据[6]。刘庆华等[7]研究表明夏季奶牛血清中谷丙转氨酶、谷草转氧酶、碱性磷酸酶的含量显著高于冬季。杨维等[5]研究表明慢性热应激条件下饮水中添加单一或复合电解质（氯化钾、氯化铵和碳酸氢钠）具有提高血清中葡萄糖含量，降低胆固醇和甘油三酯含量的作用。赵云焕等[8]研究表明在基础日粮中添加“中草药+维生素C+维生素E”抗应激复合制剂，极显著提高了青脚麻肉种鸡血液葡萄糖、总脂水平，极显著降低了谷丙转氨酶水平，显著降低了谷草转氨酶水平。谢建中[9]研究表明热应激会使谷草转氨酶和谷丙转氨酶上升，与该研究结果一致。因为在非热应激时下谷丙转氨酶和谷草转氨酶在肝细胞内不易逸出，高温热应激损伤机体细胞，细胞膜的通透性增强，谷丙转氨酶和谷草转氨酶大量进入血液。
该试验结果表明，热应激导致试验长毛兔血糖浓度降低明显，基础日粮中添加维生素C的4个试验组也出现不同程度降低。持续热应激状态下，长毛兔采食量下降、基础代谢降低，血液中血糖含量降低。
3.3维生素C对长毛兔血细胞数量的影响
目前，维生素C及其添加量对畜禽抗热应激的影响，主要集中于研究其对畜禽生产性能、生理指标、抗氧化指标和血清生化指标等的影响，而对血细胞数量的影响研究较少。孔祥浩等[10]认为维生素C可以降低异嗜白细胞与淋巴细胞比值，从而改善热应激引起的抗体反应和细胞介导的免疫反应。该试验结果表明，夏季高温热应激可使长毛兔血液淋巴细胞减少，嗜中性粒细胞增加。这主要是因为夏季高温热应激降低了长毛兔的免疫力，从而导致其淋巴细胞减少。该试验研究表明，热应激会使长毛兔红细胞数目增加，但差异不显著。究其原因，可能是因为热应激导致长毛兔体内红细胞的功能和输氧能力下降，机体为了保证足够的供氧量，红细胞代偿性增多。
4结论
夏季高温热应激条件下，长毛兔日粮中添加维生素C可减缓长毛兔热应激效应，综合考虑产毛量提高程度和添加维生素C增加的饲料成本等因素，日粮中维生素C的适宜添加量为1 000 mg/kg。
参考文献
[1] 谷子林，秦应和，任克良.中国养兔学[M].北京：中国农业出版社，2013.
[2] 魏玉荣，沈国顺，刘丽娜，等.维生素C缓解动物热应激机理的探讨[J].中国畜收兽医，2006，33（3）：18-20.
[3] 石凤霞，王继强，龙强，等.维生素C的生理功能及其在畜禽生产中的应用[J].中国饲料，2016（4）：36-38.
[4] 张昌莲，王阳铭，王德蓉，等.维生素C对高温期樱桃谷肉种鸭产蛋性能的影响[J].中国家禽，2015，37（9）：58-59.
[5] 杨维，宋子域，赵建国.电解质缓解新西兰兔热应激的生长性能及机理初步研究[J].饲料工业，2015，36（23）：55-59.
[6] 武秀香，施雪奎，吴海涛，等.热应激条件下不同黄牛群体血液生化指标变化规律分析[J].家畜生态学报，2011，32（2）：25-28.
[7] 刘庆华，王根林.热应激对奶牛血液流变学指标及血清无机离子浓度和酶活性的影响[J].福建农林大学学报（自然科学版），2007，36（3）：284-287.
[8] 赵云焕，薛邦玉，赵聘.抗热应激添加剂对肉种鸡血液生化指标和生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医（科技版），2011（4）：61-63.
[9] 谢建中.热应激对小鼠血液理化指标的影响[J].中国畜禽种业，2010（4）：143-144.
[10] 孔祥浩，郭金双.维生素C和维生素E的抗鸡热应激作用[J].中国饲料，2000（12）：13-14.
关键词 长毛兔；热应激；维生素C；生产性能；生化指标
中图分类号S829 文献标识码 A 文章编号0517-6611（2016）35-0129-04
Effects of Adding Vitamin C in the Diet on Angora Rabbits under Heat Stress
GU Jian
（Laian Branch of Agricultural Broadcasting and Television School of Anhui Province，Laian，Anhui 239200） Abstract[Objective] To discuss the alleviating effect of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits in summer. [Method] 80 10-month-old Angora rabbits were selected and randomly divided into 5 groups： control group， experiment group Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ. Under the conditions of high temperature in summer， 0， 500， 1 000， 1 500， 2 000 mg/kg vitamin C powder were added in the basal diet in control group， experiment group Ⅰ， Ⅱ， Ⅲ， Ⅳ respectively. The alleviating effects of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits were studied. [Result] Wool yield of each time of Angora rabbits could be increased by adding vitamin C in the basal diet in summer. Adding vitamin C had small effects on glucose， alanine aminatransferase（ALT）， aspartate aminotransferase（AST）， triglyceride（TG）， total cholesterol（TC） and high-density lipoprotein（HDL） in the serum of Angora rabbits， but it had greater effects on the count of white blood cell（WBC）， middle cells （MID）， neutrophilic granulocyte（GRN） and red blood cells（RBC）.Considering the cost and other factors， the suitable adding amount of vitamin C in the basal diet of Angora rabbits was 1 000 mg/kg for alleviating the heat stress in summer. [Conclusion] Under high temperature conditions in summer， the heat stress of Angora rabbits could be alleviated by adding vitamin C in the basal diet.
Key wordsAngora rabbits；Heat stress；Vitamin C；Production performance；Biochemical indices
長毛兔被毛浓密，体表没有汗腺，散热困难，在我国南方地区夏季长时间高温易引起长毛兔发生热应激综合征，主要表现在长毛兔采食量降低、生长速度缓慢、饲料转化率下降、死亡率升高，严重影响养殖户及企业的经济效益[1]。为了减缓长毛兔的热应激反应，降低高温季节长毛兔养殖业的损失，利用抗热应激药物是一种简便快捷的方法。目前，关于抗热应激研究报道较多的是家禽和生猪等，对长毛兔的抗热应激研究相对较少。抗热应激药物的研究主要集中在维生素、电解质、矿物元素、酸化剂和中草药等。笔者通过在长毛兔日粮中添加维生素C，探讨不同维生素C水平对热应激状态下长毛兔的生产性能及血液生化指标的影响，旨在为夏季长毛兔生产和抗热应激研究提供基础数据。
1材料与方法
1.1试验材料
维生素C粉购自杭州民生生物技术有限公司，耐高温，纯度95%；SOD、MDA、T-AOC等试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 1.2试验动物及其分组
体重、产毛量基本一致的10月龄长毛兔80只随机分成5组：对照组、试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。每组16只，公母各半。对照组饲喂基础日粮，试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在基础日粮中分别添加500、1 000、1 500和2 000 mg/kg维生素C粉。
1.3日粮配方
日粮为直径5 mm、长10～15 mm的颗粒饲料，具体日粮组成如下：
花生秧39.0%、豆粕13.0%、玉米14.0%、麸皮22.0%、长毛兔专用预混料4.0%、葡萄糖粉3.0%、酵母粉3.0%、石粉1.0%、蛋氨酸0.5%、赖氨酸0.3%、甜味剂0.1%、大蒜素0.1%。
1.4饲养管理
试验长毛兔由专人管理，单笼饲养，自由采食，自由饮水。试验期内每天测定兔舍内温度4次，取平均值作为当天温度。
1.5样品的采集与处理
1.5.1兔毛采集。
试验初期（7月10日）剪毛1次，试验期结束（9月25日）时剪毛1次。专人负责兔毛采集，并称重。
1.5.2血液的采集。
在试验正式开始前（6月20日）、最热的试验中期（8月5日）和高温结束的试验末期（9月25日）各耳静脉采血1次。耳静脉采血10 mL，血液分为2份，1份加入乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，测定全血各类细胞数；另1份不加抗凝劑，收集血清，-80 ℃下保存测定血清生化指标。
1.5.3血细胞数量的测定。
使用自动血细胞分析仪进行血细胞数量的测定。
1.5.4血清生化指标测定。
送至安徽医科大学第一附属医院血液检测中心测定血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白等血清生化指标。
1.6数据统计与分析
试验数据使用SPSS 13.0统计软件进行单因素方差分析和显著性检验，结果均以平均值±标准差表示。
2结果与分析
2.1日粮中添加维生素C对长毛兔产毛量的影响
试验长毛兔于7月10日和9月25日分别进行第1次和第2次剪毛。由表1可知，第1次剪毛时添加维生素C的4个试验组比产毛量对照组有所增加，但各组间差异不显著（P>0.05）。其中，试验组 Ⅱ 产量较高，比对照组提高了8.04%。75 d养毛期结束后第2次剪毛，各试验组单次产毛量均高于对照组，总体呈现出先增加后降低的趋势。其中，试验组 Ⅱ 单次产毛量较高，显著高于对照组和其他试验组（P<0.05），对照组与试验组Ⅰ、试验组Ⅲ、试验组Ⅳ间差异不显著（P>0.05）。与第1次剪毛量相比，试验组Ⅱ产毛量提高了16.53%，差异显著（P<0.05）。
2.2维生素C对长毛兔血清生化指标的影响
分别于6月20日、8月5日和9月25日进行第2次、第3次耳静脉采血，每次采血5 mL，不加抗凝剂，测定血清中葡萄糖、谷丙转氨酶等生化指标。由表2可知，高温热应激显著影响对照组长毛兔血清中的葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇等生化指标的含量（P<0.05），其中血糖含量显著降低（P<0.05），谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇含量显著增加（P<0.05）。9月下旬高温热应激对长毛兔的影响逐步减弱，除葡萄糖、谷草转氨酶以外，对照组长毛兔血清中其他生化指标含量均呈现出递减趋势，但均显著高于第1次采血时（P<0.05），与第2次相比差异不显著（P>0.05）。高密度脂蛋白的含量有所变化，但3次采血间差异不显著（P>0.05）。
从表3可以看出，第1次采血时，对照组及各试验组间血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯等生化指标差异不显著（P>0.05）；试验组Ⅰ、试验组 Ⅱ 的胆固醇和高密度脂蛋白显著高于其他组（P<0.05），但试验组Ⅰ和试验组Ⅱ间差异不显著（P>0.05）。
由表4可知，热应激时在长毛兔日粮中添加维生素C会引起长毛兔血糖葡萄糖含量升高，但试验组Ⅲ长毛兔血糖降低，且显著低于试验组Ⅰ和试验组Ⅳ（P<0.05），其他各组间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，日粮中添加不同剂量的维生素C能引起血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量不同程度增加，但差异不显著（P>0.05）。除试验组Ⅰ 外，甘油三酯、胆固醇含量总体上呈降低趋势，但各组间差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，各试验组高密度脂蛋白含量有升高趋势，但差异不显著（P>0.05）。
由表5可知，第3次采血时，各组间生化指标比较接近，没有较大差距，差异不显著（P>0.05）。
综上所述，随着夏季温度由升高到降低，长毛兔的热应激反应也呈先重后轻的趋势。总体来看，血糖在3次采集的血清中呈下降趋势，降幅较为明显，谷丙转氨酶、甘油三酯、胆固醇和高密度脂蛋白等指标呈现先升高后降低的趋势，谷草转氨酶则始终呈现升高的趋势。其中，高密度脂蛋白受温度、维生素C及其添加量的影响最小，基本处于稳定状态。
2.3维生素C对长毛兔全血各细胞数量的影响
与血清采集同时3次采集试验长毛兔耳静脉血全血添加EDTA抗凝，测定白细胞（WBC）、淋巴细胞（LYM）、中值细胞（MID）、嗜中性粒细胞（GRN）和红细胞（RBC）等细胞数量。从表6可以看出，热应激对长毛兔血液中MID和RBC数量没有显著影响（P>0.05）；第3次采集血液中的WBC和LYM的数量显著增加（P<0.05）；第2次、第3次采集血液中GRN数量显著高于第1次（P<0.05），但第2次和第3次间差异不显著。（P>0.05）
从表7可以看出，在长毛兔日粮中添加维生素C前，与对照组相比，各试验组血液WBC、LYM、MID、GRN和RBC数量没有显著差异，各组间差异也不显著。 第2次采血正处于试验期内夏季最高温阶段，长毛兔处于强度热应激状态，试验组长毛兔饲喂添加维生素C的颗粒饲料45 d，测定各组血液细胞数量。从表8可以看出，随着维生素C添加量的增加，WBC数量呈降低趋势，试验组Ⅲ WBC数量降低最为显著，与对照组和其他试验组差异显著（P<0.05）；试验组Ⅳ WBC数量高于对照组、试验组Ⅰ和试验组Ⅱ，但差异不显著（P>0.05），但显著高于试验组Ⅲ（P<0.05）。试验组Ⅲ LYM数量显著低于试验组Ⅳ，与对照组和其他试验组间无显著差异。试验组ⅣMID数量显著高于其他各组，对照组与试验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ没有显著变化。GRN数量的变化规律与WBC類似，与其他各组相比，试验组Ⅲ显著降低（P<0.05）。RBC数量的变化最为复杂，对照组和试验组Ⅲ显著低于其他各组（P<0.05），而试验组Ⅲ RBC数量显著低于对照组（P<0.05），试验组Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ间差异不显著（P>0.05）。
试验第3次采血时间在9月25日，高温已经结束，长毛兔热应激效应逐步缓解，机体机能正缓慢恢复，试验长毛兔血细胞数量也逐步恢复至第1次采血时水平。试验组Ⅰ WBC和LYM数量显著高于其他各组（P<0.05），MID、GRN和RBC数量各组间均无显著差异（P>0.05）（表9）。
综上所述，高温热应激和维生素添加量对血细胞中MID数量的影响较小，各组长毛兔的各次采血间几乎没有变化，基本维持恒定状态。
第2次采血时除试验组Ⅳ外，WBC数量其他组都相应减少，第3次采血时有所增加；各组LYM数量均在第2次采血时下降，而在第3次采血时有所增加；除试验组Ⅲ第2次GRN和RBC数量显著下降外，其他各组GRN和RBC数量均呈增加趋势，但差异不显著。
3讨论
3.1维生素C对热应激长毛兔生产性能的影响
长毛兔汗腺不发达，散热主要通过呼吸、排泄和皮肤辐射，成年兔的最适温度为15～25 ℃，适宜的温度范围为5～30 ℃。当环境温度超过35 ℃时，长毛兔呼吸加快，时间持续较长时，容易发生热应激[1]。
热应激状态下，畜禽机体细胞膜、线粒体等受损伤，蛋白质合成受抑制，引起巨噬细胞功能下降，降低机体抵抗力。维生素C的主要生理功能之一就是维持机体细胞膜的完整性，增强白细胞吞噬功能，提高网状内皮系统功能，增强机体抗热应激能力[2]。高温热应激容易引起畜禽体内维生素C缺乏，造成皮质类固醇量不足，降低了畜禽体温调节能力。畜禽体内类固醇激素有维持机体体温稳定的功能，维生素C对类固醇激素的合成起着重要的作用。因此，畜禽日粮中添加维生素C可以增强畜禽体温调节能力，维持体温基本恒定，减少热应激效应，提高其生产性能[3]。张昌莲等[4]研究表明，在高温热应激状态下在肉种鸭日粮中补充300 mg/kg的维生素C可以有效降低热应激对肉种鸭的危害，增强肉种鸭机体的适应能力，提高肉种鸭的采食量、产蛋量。杨维等[5]对新西兰肉兔的研究表明，在慢性热应激条件下饮水中添加单一或复合电解质（氯化钾、氯化铵和碳酸氢钠）提高了新西兰兔平均日增重，降低了料重比，均有较好的缓解新西兰兔热应激的效果。
该试验结果初步验证了上述理论和部分试验结果，第1次剪毛时添加维生素C的4个试验组产毛量相比对照组均有所增加，但由于维生素C饲喂时间较短，对长毛兔产毛量提高的效果不明显。第2次剪毛时，各试验组产毛量均高于对照组，尤其是试验组 Ⅱ 单次产毛量显著高于对照组和其他试验组。与第1次剪毛量相比，第2次剪毛时试验组Ⅱ产毛量显著提高了16.53%。夏季高温热应激条件下，长毛兔产毛量会出现下降，该试验中第2次剪毛长毛兔产毛量略有增加，主要由于第1次剪毛养毛期为60 d，第2次养毛期为75 d，折算成91 d标准养毛期产毛量，第2次产毛量比第1次产毛量也略有下降，但2次产毛量差异不显著。
3.2维生素C对热应激长毛兔血清生化指标的影响
维生素C参与动物机体内的氧化还原反应，具有解毒作用，可以促进抗体生成，增强肝脏的解毒能力，是目前最常用的抗应激添加剂。热应激时畜禽机体内会产生大量有害物质，而肝脏在有害物质的代谢方面起着极其重要的作用，谷丙转氨酶和谷草转氨酶是衡量肝脏功能的重要指标，血红蛋白、谷草转氨酶和谷丙转氨酶、碱性磷酸酶浓度与热应激程度紧密相关，可作为牛抗热应急指标的基本依据[6]。刘庆华等[7]研究表明夏季奶牛血清中谷丙转氨酶、谷草转氧酶、碱性磷酸酶的含量显著高于冬季。杨维等[5]研究表明慢性热应激条件下饮水中添加单一或复合电解质（氯化钾、氯化铵和碳酸氢钠）具有提高血清中葡萄糖含量，降低胆固醇和甘油三酯含量的作用。赵云焕等[8]研究表明在基础日粮中添加“中草药+维生素C+维生素E”抗应激复合制剂，极显著提高了青脚麻肉种鸡血液葡萄糖、总脂水平，极显著降低了谷丙转氨酶水平，显著降低了谷草转氨酶水平。谢建中[9]研究表明热应激会使谷草转氨酶和谷丙转氨酶上升，与该研究结果一致。因为在非热应激时下谷丙转氨酶和谷草转氨酶在肝细胞内不易逸出，高温热应激损伤机体细胞，细胞膜的通透性增强，谷丙转氨酶和谷草转氨酶大量进入血液。
该试验结果表明，热应激导致试验长毛兔血糖浓度降低明显，基础日粮中添加维生素C的4个试验组也出现不同程度降低。持续热应激状态下，长毛兔采食量下降、基础代谢降低，血液中血糖含量降低。
3.3维生素C对长毛兔血细胞数量的影响
目前，维生素C及其添加量对畜禽抗热应激的影响，主要集中于研究其对畜禽生产性能、生理指标、抗氧化指标和血清生化指标等的影响，而对血细胞数量的影响研究较少。孔祥浩等[10]认为维生素C可以降低异嗜白细胞与淋巴细胞比值，从而改善热应激引起的抗体反应和细胞介导的免疫反应。该试验结果表明，夏季高温热应激可使长毛兔血液淋巴细胞减少，嗜中性粒细胞增加。这主要是因为夏季高温热应激降低了长毛兔的免疫力，从而导致其淋巴细胞减少。该试验研究表明，热应激会使长毛兔红细胞数目增加，但差异不显著。究其原因，可能是因为热应激导致长毛兔体内红细胞的功能和输氧能力下降，机体为了保证足够的供氧量，红细胞代偿性增多。
4结论
夏季高温热应激条件下，长毛兔日粮中添加维生素C可减缓长毛兔热应激效应，综合考虑产毛量提高程度和添加维生素C增加的饲料成本等因素，日粮中维生素C的适宜添加量为1 000 mg/kg。
参考文献
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[2] 魏玉荣，沈国顺，刘丽娜，等.维生素C缓解动物热应激机理的探讨[J].中国畜收兽医，2006，33（3）：18-20.
[3] 石凤霞，王继强，龙强，等.维生素C的生理功能及其在畜禽生产中的应用[J].中国饲料，2016（4）：36-38.
[4] 张昌莲，王阳铭，王德蓉，等.维生素C对高温期樱桃谷肉种鸭产蛋性能的影响[J].中国家禽，2015，37（9）：58-59.
[5] 杨维，宋子域，赵建国.电解质缓解新西兰兔热应激的生长性能及机理初步研究[J].饲料工业，2015，36（23）：55-59.
[6] 武秀香，施雪奎，吴海涛，等.热应激条件下不同黄牛群体血液生化指标变化规律分析[J].家畜生态学报，2011，32（2）：25-28.
[7] 刘庆华，王根林.热应激对奶牛血液流变学指标及血清无机离子浓度和酶活性的影响[J].福建农林大学学报（自然科学版），2007，36（3）：284-287.
[8] 赵云焕，薛邦玉，赵聘.抗热应激添加剂对肉种鸡血液生化指标和生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医（科技版），2011（4）：61-63.
[9] 谢建中.热应激对小鼠血液理化指标的影响[J].中国畜禽种业，2010（4）：143-144.
[10] 孔祥浩，郭金双.维生素C和维生素E的抗鸡热应激作用[J].中国饲料，2000（12）：13-14.