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摘要：血凝检测与诸多因素有着密切关系，如：样本的采集、运送、保存；试剂的选用、复溶、预温和储存；仪器的选择、保养、监控和校准；参考范围的确定；检验人员的熟悉程度；操作规范的执行情况；凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APPT）危急值的处理；室内、室间质控情况；检验报告的正确填写或输入；检验报告的复核；与临床的沟通等。
关键词：样本采集；血凝检测；影响
【中图分类号】R331.1+43 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）01-0090-02
一、样本对血凝检测结果的影响
1样本采集与处理
1.1采血技术
1.1.1患者处于平静、空腹状态医务人员应帮助患者消除紧张情绪，避免血小板、凝血因子的激活；止血带不应拉得太紧，最好不要超过5min，必须顺利“一针见血”，避免混入组织液或发生溶血。因为组织液中会有丰富的因子Ⅷ，可激活外源性凝血途径，加速凝血酶原的消耗，使试验结果偏低。采血液与抗凝剂混匀，不宜用力振摇，避免用力振荡破坏凝血蛋白；宜采用真空采血管，可颠倒混匀。采血时有多管，宜采用第2管。采血时不能有气泡，气泡会使纤溶蛋白原、因子V、因子Ⅷ变性。
1.1.2试管要求一次性注射器，硅化玻璃管，要求2mL血量规格。
1.1.3抗凝剂选用常用的抗凝剂是枸橼酸钠。因为因子Ⅴ和因子Ⅷ在枸橼酸钠中稳定。不宜使用EDTA-2Na、肝素、草酸盐抗凝。肝素影响还适用于接受肝素治疗的病人的监测。而草酸盐能与钙离子形成不溶性沉淀物，影响血凝仪的光电终点。EDTA能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成纤维蛋白原单体聚合，且对因子Ⅴ保护性差。抗凝剂与全血的比例：抗凝剂与全血的比例为1∶9，不严格控制比例会改变血浆的钙离子浓度而影响结果（要求血量与采血管标本的体积差要≤10%）。
1.2样本保存
样本保存受时间和温度影响，由于凝血因子易失活，室温条件下，试管加塞避免CO2扩散而使pH改变。血浆标本原则上应立即检测，血液一旦离体后即开始变化，随离体的时间不同凝血因子逐渐消耗，从而检测出的结果也不同。从样本采集起，PT 2h之内、TT 2h之内、APTT 2h之内完成检测。凝血试验在室温保存4h内完成，如果不能及时检测完成，放置4℃冰箱保存，24h内完成。不能完成将血浆放置在-20℃冷冻存放1周。试验PT血浆应于37℃快速融化，不要超过10min；TT试剂预温不宜超过30min，不能反复冻融。血液采集进入空器及进入实验所用时间越短，凝血因子保护越好。
1.3样本运送和处理
最好在实验室内采血，样本应随采随测，病房患者的样本尽快送到实验室，尽量减少运输和储存时间，防止日光直射，以避免凝血因子降低酶活性。
3000r/min离心10min，标本离心后如发现有溶血或小凝块应重抽，血中的乳糜微粒等将对血凝试验结果造成干扰，应通知临床医生。出现这种情况都严重影响结果。
二、过程外因素对血凝检测结果的影响
2.1操作的因素
操作技术对检验结果有很大的影响，某个环节不正确将会造成试验结果的明显变化。
检查仪器电源、光源是否稳定，预热时间或温度是否正确。温度过高过低都影响检验结果。检查所有试剂、缓冲液、标本是否合格，如发现问题及时纠正。
每次检测之前，应先检测质控血浆的数值，以确保检测结果的准确性。血浆预温不宜超过10min。加试剂时量要准确，要防止气泡的产生，有气泡时凝血时间会延长，出现错误的结果。加样器与反应杯垂直，加样时间要掌握好，加样动作要稳、准、快。既要让反应杯与感应器充分接触，又不能停顿时间过长。测定过程中应保持反应杯的清洁，防止异物掉入比色杯。
2.2药物和其他因素
药物本身影响凝血机制，如用肝素、华法林可抑制凝血酶，严重影响干扰凝血酶原试验，使凝血酶原时间延长。DIC患者在早期血液处于高凝状态，PT时间缩短，但在大量消耗凝血因子和产生的FDP拮抗凝酶的作用时，PI时间延长。
生理变化：妊娠、激动或剧烈运动精神紧张等因素都会影响凝血检测的结果。在凝血检测中，以上各种原因都会影响凝血检测结果。出现异常结果时，应联系咨询病情，诊断是否用抗凝药或在溶栓治疗，抽血是否顺利。检验人员收集标本一定要观察采血量，有无凝血块，离心后有无脂血，溶血观察血浆的颜色，不合格的标本退回重抽，否则会造成不正确的结果。只有掌握和了解各种不利因素，才能避免出现错误的结果。保证质量才能更好为临床服务，提供准确的数据。
2.3试剂使用及要求
不同的凝血活酶试剂有不同的最佳适用范围，应选用适合检测的仪器，适合本实验室目的凝血活酶，严格按照说明书使用，注意有效期和稳定性。取溶试剂使用后，立即放入冰箱2～8℃保存[2]，每次使用要求混匀，发现试剂混浊立即遗弃。复溶后的试剂不能反复冻融。严格控制好APTT试剂中的CaCl2浓度。试剂使用中要注意污染的问题，避免试剂瓶盖错盖造成交叉污染；同一试剂用同一吸管或移液头，不能交叉使用，否则会造成试剂标本的交叉污染。
三、结论
由此可见，血凝检验结果受多方面因素的影响。新材料和新技术的应用将影响护理部和检验科的合作，样本前处理的很多工作都涉及到护理部，护理部和检验科加强学习与沟通使大家对检验项目有一定的了解，并规范样本的采集及送检时间的控制这样才能从各方面提高检验结果的准确性。只有掌握和了解这些，才能尽可能避免不利因素的干扰和错误的解释，才能真正给临床以帮助。
参考文献
[1] 冯永青，翟春玺. 不同时间、温度、抗凝剂对血浆凝血酶原时间测定结果的影响[J]. 陕西醫学检验. 2013.
[2] 刘颖燕，徐彩萍. 样本采集对血凝检测结果的影响[J]. 检验医学. 2008.
[3] 李立青. 标本放置时间及温度对凝血三项测定结果的影响[J]. 大理学院学报2014.
[4] 肖秀林，陈红宇，王昌富，等. PT和APTT样本采集顺序和保存温度的探讨[J]. 上海医学检验杂志，2011.
关键词：样本采集；血凝检测；影响
【中图分类号】R331.1+43 【文献标识码】A 【文章编号】1672-8602（2015）01-0090-02
一、样本对血凝检测结果的影响
1样本采集与处理
1.1采血技术
1.1.1患者处于平静、空腹状态医务人员应帮助患者消除紧张情绪，避免血小板、凝血因子的激活；止血带不应拉得太紧，最好不要超过5min，必须顺利“一针见血”，避免混入组织液或发生溶血。因为组织液中会有丰富的因子Ⅷ，可激活外源性凝血途径，加速凝血酶原的消耗，使试验结果偏低。采血液与抗凝剂混匀，不宜用力振摇，避免用力振荡破坏凝血蛋白；宜采用真空采血管，可颠倒混匀。采血时有多管，宜采用第2管。采血时不能有气泡，气泡会使纤溶蛋白原、因子V、因子Ⅷ变性。
1.1.2试管要求一次性注射器，硅化玻璃管，要求2mL血量规格。
1.1.3抗凝剂选用常用的抗凝剂是枸橼酸钠。因为因子Ⅴ和因子Ⅷ在枸橼酸钠中稳定。不宜使用EDTA-2Na、肝素、草酸盐抗凝。肝素影响还适用于接受肝素治疗的病人的监测。而草酸盐能与钙离子形成不溶性沉淀物，影响血凝仪的光电终点。EDTA能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成纤维蛋白原单体聚合，且对因子Ⅴ保护性差。抗凝剂与全血的比例：抗凝剂与全血的比例为1∶9，不严格控制比例会改变血浆的钙离子浓度而影响结果（要求血量与采血管标本的体积差要≤10%）。
1.2样本保存
样本保存受时间和温度影响，由于凝血因子易失活，室温条件下，试管加塞避免CO2扩散而使pH改变。血浆标本原则上应立即检测，血液一旦离体后即开始变化，随离体的时间不同凝血因子逐渐消耗，从而检测出的结果也不同。从样本采集起，PT 2h之内、TT 2h之内、APTT 2h之内完成检测。凝血试验在室温保存4h内完成，如果不能及时检测完成，放置4℃冰箱保存，24h内完成。不能完成将血浆放置在-20℃冷冻存放1周。试验PT血浆应于37℃快速融化，不要超过10min；TT试剂预温不宜超过30min，不能反复冻融。血液采集进入空器及进入实验所用时间越短，凝血因子保护越好。
1.3样本运送和处理
最好在实验室内采血，样本应随采随测，病房患者的样本尽快送到实验室，尽量减少运输和储存时间，防止日光直射，以避免凝血因子降低酶活性。
3000r/min离心10min，标本离心后如发现有溶血或小凝块应重抽，血中的乳糜微粒等将对血凝试验结果造成干扰，应通知临床医生。出现这种情况都严重影响结果。
二、过程外因素对血凝检测结果的影响
2.1操作的因素
操作技术对检验结果有很大的影响，某个环节不正确将会造成试验结果的明显变化。
检查仪器电源、光源是否稳定，预热时间或温度是否正确。温度过高过低都影响检验结果。检查所有试剂、缓冲液、标本是否合格，如发现问题及时纠正。
每次检测之前，应先检测质控血浆的数值，以确保检测结果的准确性。血浆预温不宜超过10min。加试剂时量要准确，要防止气泡的产生，有气泡时凝血时间会延长，出现错误的结果。加样器与反应杯垂直，加样时间要掌握好，加样动作要稳、准、快。既要让反应杯与感应器充分接触，又不能停顿时间过长。测定过程中应保持反应杯的清洁，防止异物掉入比色杯。
2.2药物和其他因素
药物本身影响凝血机制，如用肝素、华法林可抑制凝血酶，严重影响干扰凝血酶原试验，使凝血酶原时间延长。DIC患者在早期血液处于高凝状态，PT时间缩短，但在大量消耗凝血因子和产生的FDP拮抗凝酶的作用时，PI时间延长。
生理变化：妊娠、激动或剧烈运动精神紧张等因素都会影响凝血检测的结果。在凝血检测中，以上各种原因都会影响凝血检测结果。出现异常结果时，应联系咨询病情，诊断是否用抗凝药或在溶栓治疗，抽血是否顺利。检验人员收集标本一定要观察采血量，有无凝血块，离心后有无脂血，溶血观察血浆的颜色，不合格的标本退回重抽，否则会造成不正确的结果。只有掌握和了解各种不利因素，才能避免出现错误的结果。保证质量才能更好为临床服务，提供准确的数据。
2.3试剂使用及要求
不同的凝血活酶试剂有不同的最佳适用范围，应选用适合检测的仪器，适合本实验室目的凝血活酶，严格按照说明书使用，注意有效期和稳定性。取溶试剂使用后，立即放入冰箱2～8℃保存[2]，每次使用要求混匀，发现试剂混浊立即遗弃。复溶后的试剂不能反复冻融。严格控制好APTT试剂中的CaCl2浓度。试剂使用中要注意污染的问题，避免试剂瓶盖错盖造成交叉污染；同一试剂用同一吸管或移液头，不能交叉使用，否则会造成试剂标本的交叉污染。
三、结论
由此可见，血凝检验结果受多方面因素的影响。新材料和新技术的应用将影响护理部和检验科的合作，样本前处理的很多工作都涉及到护理部，护理部和检验科加强学习与沟通使大家对检验项目有一定的了解，并规范样本的采集及送检时间的控制这样才能从各方面提高检验结果的准确性。只有掌握和了解这些，才能尽可能避免不利因素的干扰和错误的解释，才能真正给临床以帮助。
参考文献
[1] 冯永青，翟春玺. 不同时间、温度、抗凝剂对血浆凝血酶原时间测定结果的影响[J]. 陕西醫学检验. 2013.
[2] 刘颖燕，徐彩萍. 样本采集对血凝检测结果的影响[J]. 检验医学. 2008.
[3] 李立青. 标本放置时间及温度对凝血三项测定结果的影响[J]. 大理学院学报2014.
[4] 肖秀林，陈红宇，王昌富，等. PT和APTT样本采集顺序和保存温度的探讨[J]. 上海医学检验杂志，2011.