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参照抗菌肽Shiva-1的氮基酸序列,兼顾鱼类、昆虫和大肠杆菌偏爱的密码子,设计了Shiva-1基因序列,加上适宜基因工程操作的酶切位点,人工合成了2条分别为92bp和91bp的寡聚核苷酸片段。经互补链延伸反应、EcoRI酶切,将完整的Shiva-1基因反向克隆至pUC18载体,经PCR检测和序列分析证明,已正确克隆了抗菌肽Shiva-1基因。