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目的
研究轮状病毒（RV）我国地方株VP4基因特点，并获得高效表达的VP4。
方法采用RT-PCR技术扩增RV P1A型我国地方株CR188的完整VP4基因，克隆到原核表达质粒pET21a（+ ）中:（1）用末端终止法进行核苷酸序列测定，并与人（HRV）标准株作比较分析。（2）重组质粒转化原核表达宿主菌E.coli BL21（DE3）,异丙硫半乳糖甙（IPTG）诱导表达，经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western blot对其表达产物进行鉴定。
结果（1）CR188 VP4基因全长2359bp，含编码775个氨基酸的单一的开放读码框架（ORF）,与相同血清型标准株之间氨基酸序列具有高度同源性（94% ~98%）,与不同血清型标准株间相比较，则同源性较低（64% ~78%）。（2）重组VP4表达量在诱导2~3小时时最高，占细胞总蛋白的11%；表达蛋白与小鼠抗A组RV VP4 P1A型特异性单克隆抗体（单抗）发生反应。
结论序列分析预测血清型的结果与临床标本的实验室诊断一致，CR188 VP4为P1A型；VP4全基因在原核系统中获得表达，表达的重组VP4抗原可被型特异性单抗识别。