牛m1和m5受体内环3区的克隆及主动脉内皮细胞上两种受体mRNA表达的检测

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目的:克隆牛m1和m5受体亚型特异性区域内环(innerloop)3区,并检测牛主动脉内皮细胞上两种受体mRNA的表达.方法:根据人、小鼠的m1和m5受体序列,设计并合成针对两种受体内环3区的特异性引物.采用RT-PCR法从牛海马组织中扩增牛m1和m5受体内环3区,并通过半定量RT-PCR法检测两种受体mRNA在传代培养前后的牛主动脉内皮细胞中的表达.结果:序列测定与对比表明克隆得到了牛m1和m5受体内环3区.半定量RT-PCR结果显示,原代牛主动脉内皮细胞表达m1受体mRNA而未检测到m5受体mRNA,两种受体mRNA在传10代的培养牛主动脉内皮细胞中均未检测到有表达.结论:本研究为探讨血管内皮细胞上介导乙酰胆碱诱发血管舒张反应的受体与M受体的关系提供了线索.
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