不同条件下人乳白蛋白YAC的高效定点打靶修饰

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：levychan

【摘要】

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目的：对人乳白蛋白酵母人工染色体(HLA-YAC)进行定点改造，以便进一步利用该载体作与基因表达调控相关的研究。方法：借助kar1突变使YPH925菌株与异交配型菌株交配时丧失核融合的

【作者】

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张绪峰吴国祥朱克军焦炳华成国祥

【机构】

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第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室,上海转基因研究中心

【出处】

：

第二军医大学学报

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

人乳白蛋白 YAC 高效定点打靶修饰酵母人工染色体酵母人工染色庠转移 yeast artificial chromosome human α-lactalb

【基金项目】

：

上海市自然科学基金(012F14064).

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目的：对人乳白蛋白酵母人工染色体(HLA-YAC)进行定点改造，以便进一步利用该载体作与基因表达调控相关的研究。方法：借助kar1突变使YPH925菌株与异交配型菌株交配时丧失核融合的能力，把HLA-YAC由酵母AB1380转移到his3缺陷的YPH925菌株。分别以HIS3(对YPH925菌株)和(G418R(对YPH925和AB1380两种菌株)为选择标记，用含HLA-YAC的酵母基因组为模板，PCR克隆人乳白蛋白(HLA)基因的5’和3’端非翻译区各684 bp和940 bp为同源臂，构建打靶载体，

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