【摘 要】
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BRMS1基因和多种肿瘤的转移有关,但其在肝癌发生和转移中的作用及机制仍有待研究.Westernblot的结果显示在SK-HEP-1细胞中检测到差异剪接体2的表达,Hep G2细胞仅检测到差异剪
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BRMS1基因和多种肿瘤的转移有关,但其在肝癌发生和转移中的作用及机制仍有待研究.Westernblot的结果显示在SK-HEP-1细胞中检测到差异剪接体2的表达,Hep G2细胞仅检测到差异剪接体1,而L-02和Hep 3B细胞两种差异剪接体都表达,而且在表达差异剪接体1的3株细胞中,Hep 3B细胞差异剪接体1的表达量较高,另两个较低.实时定量PCR对BRMS1基因差异剪接体1的表达进一步检测,发现SK-HEP-1细胞的表达水平最低,Hep 3B最高,L-02和Hep G2介于两者之间.随后以Hep G2细胞的mRNA为模板,扩增人的BRMS1基因差异剪接体1,构建pEGFP-BRMS1质粒,在SK-HEP-1细胞株进行过表达,并用Annexin V-PE和7-AAD双染的流式细胞术研究BRMS1对SK-HEP-1细胞凋亡的影响,结果显示:pEGFP-BRMS1转染组两种染料双阳性,即处于凋亡后期的细胞数目显著高于pEGFP-N2对照组;用PI单染检测存活率,发现pEGFP-BRMS1转染组与pEGFP-N2对照组相比存活率显著降低.上述实验结果表明,BRMS1基因的过表达能够促进SK-HEP-1细胞的凋亡,抑制细胞生存,从而为BRMS1基因抑制肝癌转移机制的阐明提供思路.
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