人MMP-11原核表达载体pGEX-5X-3／MMP-11的构建及其融合蛋白的表达和纯化

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【摘要】

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目的构建表达人基质金属蛋白酶-11（MMP-11）N．端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3／MMP-11，获得人源性MMP-11融合蛋白。方法应用逆转录一聚合酶链式反应（RT—PCR）从正常人子宫内膜组

【作者】

：

郑晶陆惠玲刘加军陈森吕德坚孙宏钰

【机构】

：

中山大学基础医学院法医物证学教研室,中山大学附属第三医院血液肿瘤科

【出处】

：

热带医学杂志

【发表日期】

：

2006年3期

【关键词】

：

基因重组基质金属蛋白酶-11 表达与纯化原核表达载体 gene recombination matrix metalloproteinase- 11 e

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目的构建表达人基质金属蛋白酶-11（MMP-11）N．端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3／MMP-11，获得人源性MMP-11融合蛋白。方法应用逆转录一聚合酶链式反应（RT—PCR）从正常人子宫内膜组织扩增目的基因片段．利用体外基因重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-5X-3上构成重组的原核表达载体pGEX-5X-3／MMP—11，并通过酶切和测序进行鉴定。将重组质粒转化人大肠杆菌DH50t后挑选阳性克隆，用异丙基硫代半乳糖苷诱导其融合蛋白的表达并进行纯化。结果 RT—PCR获得

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