【摘 要】
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目的 探讨CD109对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测CD109在OSCC细胞中的表达.通过siRNA技术将空载体和CD109-siRNA转染至人舌鳞癌Cal27细胞,并分别作为对照组(siNC)和CD109干扰组(siCD109).细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,基因富集分析检测CD109影响OSCC的潜在机制并通过蛋白质
【机 构】
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江南大学附属医院口腔科,江苏 无锡 214000;江南大学附属医院病理科,江苏 无锡 214000;江南大学无锡医学院公共卫生与预防医学系病原感染与免疫研究室,江苏 无锡 214000
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目的 探讨CD109对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 定量逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测CD109在OSCC细胞中的表达.通过siRNA技术将空载体和CD109-siRNA转染至人舌鳞癌Cal27细胞,并分别作为对照组(siNC)和CD109干扰组(siCD109).细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,基因富集分析检测CD109影响OSCC的潜在机制并通过蛋白质印迹法验证.结果 CD109 mRNA和蛋白在OSCC细胞系中高表达,在口腔上皮细胞中低表达,P<0.001.转染CD109-siRNA后,siCD109组细胞中CD109 mRNA水平为0.27±0.07,siNC组为1.00±0.00,差异有统计学意义,t=18.102,P=0.003.siCD109组CD109蛋白表达水平为0.54±0.10,siNC组为1.41±0.15,差异有统计学意义,t=8.365,P=0.020.siCD109组细胞的生长速度低于siNC组,差异有统计学意义,t=12.571,P<0.001.siCD109组细胞的EdU阳性率〔(16.23±3.80)％〕低于siNC组〔(30.33±5.14)％〕,差异有统计学意义,t=3.821,P=0.018.相较于siNC组细胞,siCD109组G1期(t=6.151,P=0.004)和G2期(t=5.704,P=0.005)细胞比例增加,S期(t=6.642,P=0.003)细胞比例下降,差异有统计学意义;siCD109组细胞划痕愈合速度〔(50.05±4.81)％〕低于siNC组〔(75.27±5.16)％〕,差异有统计学意义,t=6.220,P=0.003.siCD109组侵袭细胞数量为(258±45)个,低于siNC组的(455±20)个,差异有统计学意义,t=6.292,P=0.003.siCD109组细胞的PI3K/AKT磷酸化水平较siNC组低,差异有统计学意义,均P<0.05.结论 CD109通过PI3K/AKT信号通路抑制OSCC细胞迁移和侵袭,可能是OSCC潜在的治疗靶点.
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