利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽草酰-3-磷酸合酶（EPSPS）基因

来源 :高技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jees_giggle

【摘要】

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为探索利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽革酰-3-磷酸合酶（EPSPS）基因，直接从土壤中提取细菌DNA，构建草甘膦污染土壤细菌宏基因组文库，并利用EPSP合酶缺失突变株E

【作者】

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陆伟梁爱敏孟秀萍顿宝庆金丹穆文超林敏

【机构】

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中国农业科学院生物技术研究所

【出处】

：

高技术通讯

【发表日期】

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2006年12期

【关键词】

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宏基因组 5-烯醇式丙酮莽草酰 -3-磷酸合酶(EPSPS) 草甘膦 metagenomics 5-enolpyruvyl shikimate-3-phosp

【基金项目】

：

863计划（2004AA214170）资助项目.

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为探索利用宏基因组文库筛选草甘膦不敏感的5-烯醇式丙酮莽革酰-3-磷酸合酶（EPSPS）基因，直接从土壤中提取细菌DNA，构建草甘膦污染土壤细菌宏基因组文库，并利用EPSP合酶缺失突变株ER2799筛选到4个能互补EPSP合酶功能的克隆，其中两个克隆的转化子能够在含5mmol／L草甘膦的MOPS培养基上生长。测序结果表明它们均含有完整的EPSP合酶编码基因，GT-1aroA核苷酸长度为1335bp，编码445个氨基酸，GT-4aroA核苷酸长度为1350bp，编码450个氨基酸。利用PCR方法将两个基因克

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