目的 探究并验证三白汤治疗皮肤色素沉着的作用机制.方法 通过TCMSP、TCMID以及BATMAN-TCM数据库收集三白汤化学成分和作用靶点,通过检索GeneCards、DisGeNET数据库获得皮肤色素沉着的疾病靶点.取两靶点集的交集,进而保留相关化学成分,应用Cytoscape建立化学成分-潜在靶点网络.将交集靶点导入STRING数据库,得到交集靶点的相互作用网络.采用CytoHubba、DAVID和Kobas对交集靶点的相互作用网络进行拓扑分析、GO和KEGG富集分析.利用AutoDock 4.2对关键靶点进行分子对接研究.基于B16-F10黑色素瘤细胞,构建抗黑色素模型,验证分子对接结果.结果 筛选获得三白汤活性成分29个、潜在作用靶点23个.拓扑分析得到酪氨酸酶、雌激素受体1、孕激素受体等8个关键靶点,主要参与涉及男性性腺发育、对雌二醇的反应等GO富集分析所示的生命过程.KEGG通路分析得到123条主要信号通路,主要涉及黑色素合成、雌激素信号通路、酪氨酸代谢等.分子对接结果显示,三白汤化学成分与潜在靶点具有较好的结合活性.细胞实验表明,三白汤中代表性成分的抗黑色素活性顺序与分子对接结果一致.结论 三白汤通过其中芍药内酯苷、β-谷甾醇、α-香树精等有效成分,作用于连环蛋白β1(catenin beta 1,CTNNB1)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)等靶点,调节黑色素合成、酪氨酸代谢等信号通路,最终减少黑色素合成以治疗色素沉着.