一种基于钝顶螺旋藻藻蓝蛋白荧光猝灭法的汞离子传感新方法

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采用反复冻融细胞破裂法、硫酸铵分级盐析以及羟基磷灰石柱层析,从钝顶螺旋藻中提取出高纯度的藻蓝蛋白样品,纯度(A620/A280)达4.1。该蛋白的紫外-可见吸收光谱表明其特征吸收峰为280、360、620nm,荧光光谱表明其最大发射波长为650 nm。以该藻蓝蛋白为荧光探针,发展了一种基于荧光猝灭法的Hg2+检测新方法。并考察了缓冲体系、缓冲液pH值、反应时间、温度以及藻蓝蛋白的浓度等因素对汞离子检测的影响,在0.05 mol/L、pH 7.5的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲液中,当藻蓝蛋白浓度为3 mg/L、反应时间为30 min、反应温度为30℃时,该方法的线性范围为0.1~10μmol/L,检出限为0.056μmol/L。该方法表现出良好的汞离子传感选择性,而且当干扰离子与汞离子的浓度比为40∶1时,多种共存离子对汞离子的检测影响较小。该方法荧光探针提取容易,价格低且环境友好,具有较高的灵敏度和较好的重现性。
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