内含人前列腺特异性抗原mRNA的耐核糖核酸酶病毒样颗粒的构建和表达

来源 :中华老年医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huanhuan40705
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  [摘要] 目的 构建原核表达系统,表达内含人前列腺特异性抗原(prostatespecific antigen,PSA)mRNA部分序列的病毒样颗粒,该病毒样颗粒因噬菌体蛋白包被重组RNA而使其包裹的RNA具有耐核糖核酸酶(RNase)的特性。 方法 采用聚合酶链反应扩增人前列腺特异性抗原cDNA的部分保守区域,进行TA克隆后用限制性内切酶HindⅢ酶切获得所需要的目的片段,与用HindⅢ酶切的表达载体pNCCL1相连接,构建一新的表达载体pNCCLl—PSA,再转化E.Coli1 BL21—DE3,用IPTG诱导表达噬菌体MS2包膜蛋白,包膜蛋白可进行自我组装成病毒样颗粒并将PSAmRNA部分序列包裹到病毒样颗粒内。结果 成功构建得到了新的表达载体pNCCL1—PSA,经原核表达得到耐RNase的内含PSAmRNA部分RNA序列的病毒样颗粒。结论 本研究得到的表达载体pNCCLl—PSA及原核表达系统,可以作为以后构建和制备耐RNase的PSAmRNA标准品和质控品的的平台,为实验室PSAmRNA的检测提供新的标准品及质控品。
  [关键词] 前列腺特异性抗原;病毒粒子;噬菌体
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[摘要] 目的 探讨70岁以上老年人口腔黏膜鳞癌综合治疗的疗效及其围手术期的处理原则。 方法 收集1991—2001年行计划性诱导性顺铂为主综合治疗的年龄≥70岁(≥70岁组)的72例患者治疗情况,与同期同治疗方案年龄<70岁(<70岁组)72例患者和同期单纯手术根治的26例患者(单纯手术组)的情况进行对比。 结果 ≥70岁组12、24、36个月生存率分别是84.6%、73.0%和68
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一、临床资料  1.一般资料:2004年3月至2005年4月嘉兴地区7所医院共收治60岁以上老年2型糖尿病并发低血糖症患者76例,其中男45例,女31例,年龄64~80岁,平均66岁。糖尿病病程、1~20年,入院时即刻血糖浓度均低于3.0 mmol/L,符合老年人低血糖的诊断标准。在本组病例中,合用2种同类磺酰脲类药物11例,服用较大剂量的优降糖2例,使用胰岛素不当2例;并存高血压、冠心病9例(常
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[摘要] 目的探讨罗格列酮对载脂蛋白E(apoE)基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块稳定性的影响及其可能机制。方法 32只6周龄叩。E基因敲除小鼠随机分为罗格列酮组(18只)和对照组(14只),普通饮食14周后处死;切取小鼠主动脉根部制备石蜡切片,免疫组化法半定量测定两组粥样斑块内巨噬细胞、平滑肌细胞及炎性因子基质金属蛋白酶—9和肿瘤坏死因子—α的阳性率;Masson法半定量观察两组胶原纤维的灰度
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