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摘要 采用人工摩擦接种鉴定方法，对2004—2008年吉林省选育的30份大豆新品种（系）进行针对东北大豆花叶病毒主要流行株系1号株系和3号株系的抗性鉴定。结果表明：对1号株系表现抗病及以上的品种18份，占参鉴总数的60.00%，表现感病的品种4份，占参鉴总数的13.33%；对3号株系表现抗病及以上的品种7份，占参鉴总数的23.33%，表现感病及以上的品种15份，占参鉴总数的50.00%；对1号和3号株系均表现抗病及以上的品种7份，占参鉴总数的23.33%。
关键词 大豆；新品种（系）；大豆花叶病毒病；抗性鉴定
中图分类号 S656.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）24-0019-02
由大豆花叶病毒（soybean mosaic virus，SMV）引起的大豆花叶病毒病是一种世界性大豆病害，在我国各大豆产区普遍发生，严重影响大豆的产量和品质[1-3]。选育和应用抗病品种是防治大豆花叶病毒病最经济有效的措施[4-6]。该研究对2004—2008年吉林省选育出的30份大豆新品种（系）进行了针对东北大豆花叶病毒主要流行株系的抗性鉴定与评价，明确其抗性表现，以淘汰感病品种，选出抗性品种推广种植，防止病害流行造成损失。
1 材料与方法
1.1 供试品种
2004—2008年参加吉林省大豆新品种抗病性鉴定的30份大豆新品种（系），来自全省各育种单位。
1.2 病毒株系
经过鉴别，寄主的大豆花叶病毒1号和3号株系是东北大豆花叶病毒主要流行株系，其中1号株系是弱毒株系，3号株系是强毒株系。在防蚜网室内通过无病繁毒寄主进行扩繁[7-8]。
1.3 鉴定方法
人工接种鉴定在防蚜网室内进行，参鉴材料按照生育期顺序排列，每品种种植行长5 m，1行区，10 cm等距点播。每10份参鉴材料间设1组抗病和感病对照品种。每份材料连续鉴定2年，以记载的最高发病程度，对鉴定材料进行抗病性评价。
接种前在繁毒株上采集具有典型花叶病毒株系症状的新鲜叶片，剪碎后稍作冷冻，在低温条件下研磨成匀浆。按1∶20质量比加入0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（pH值7.0），配制成病毒接种液。接种前在接种液中添加2% 600目金刚砂并搅拌均匀备用。当待鉴大豆第1片复叶充分展开时，分别用短毛刷人工摩擦接种大豆花叶病毒病1号和3号株系，避免交叉感染，接种后及时喷清水冲刷掉叶片上的病毒汁液。
1.4 病情调查
接种15～20 d后，待参鉴品种（系）普遍发病，症状稳定，病害特征明显，对其进行病情级别调查。病情级别划分采用6级分级标准[9]：0级，无症状反应；1级，轻花叶型，植株生长正常，叶片平展不皱，或有黄绿与暗绿相间的轻花叶；3级，重花叶型，植株生长基本正常，叶片明脉微皱，有明显黄绿相间的斑驳；5级，皱花叶型，植株生长接近正常，不矮化，叶片有波状斑或沿叶缘曲叶或泡状突起，黄化型叶片有黄斑；7级，皱缩型，植株生长不正常，略矮化及黄化，叶片明显皱缩，呈泡状畸形卷曲；9级，矮化型，植株极端矮化，叶片僵化狭窄、畸形卷曲，严重的出现顶端坏死，芽枯或黄萎。
1.5 抗性评价
计算病情指数，采用5级抗性评价标准进行抗性评价，高抗（HR）：0<病情指数≤20；抗病（R）：20<病情指数≤35；中抗（MR）：35<病情指数≤50；感病（S）：50<病情指数≤70；高感（HS）：病情指数>70。病情指数计算公式如下：
2 结果与分析
2.1 参鉴大豆品种的抗性鉴定结果
对30份大豆新品种（系）进行人工摩擦接种大豆花叶病毒1号和3号株系的抗性鉴定结果见表1。可以看出，对1号株系表现高抗的品种有14份，占参鉴总数的46.67%；表现抗病的有4份，占13.33%；表现中抗的有8份，占26.67%；表现感病的有4份，占13.33%；无表现高感品种。对3号株系表现高抗的品种有3份，占参鉴总数的10.00%；表现抗病的有4份，占13.33%；表现中抗的有8份，占26.67%；表现感病的有7份，占23.33%；表现高感的有8份，占26.67%。
2.2 鉴定得到的兼抗品种
鉴定结果表明，对1号和3号株系均表现抗病及以上的品种有7份：平安1006、丰交2004、吉农2002-1、吉農2001-1-4、长C2005-1、公交2002-339-2、公交2001-335-6，占参鉴总数的23.33%。建议在生产上尤其是病毒病高发地区推广种植。
3 结论与讨论
从30份大豆新品种（系）抗花叶病毒病鉴定结果可知：对1号株系表现抗病及以上的品种有18份，占60.00%；对3号株系表现抗病及以上的品种有7份，占23.33%；对1号和3号株系均表现抗病及以上的品种有7份，占23.33%；对1号和3号株系均表现感病的品种有4个，分别是利民98006、九交9895-8、长B2004-88和公交DY2004-6，占13.33%。
大豆花叶病毒病是吉林省大豆生产中的重要病害之一，种植抗病品种是最经济有效的防治措施。从该研究的鉴定结果看，参鉴品种对东北大豆花叶病毒病主要流行株系的抗性整体表现较好，对于3号强毒株系的感病程度重于1号株系，在今后的育种工作中要引起重视。对鉴定出的感病品种要予以淘汰，筛选出的兼抗品种即可用于大豆生产，也可用作抗源材料。
4 参考文献
[1] 吕文清，张明厚，魏培文，等.东北三省大豆花叶病毒（SMV）株系的种类与分布[J].植物病理学报，1985，15（4）：225-228.
[2] 杨崇良，尚佑芬，李长松，等.我国北方地区大豆品种资源对大豆花叶病毒抗性鉴定[J].山东农业科学，1995（5）：22-25.
[3] 刘玉芝，廖林，孙大敏.对大豆花叶病毒（SMV）病抗源的筛选[J].吉林农业科学，1997（1）：30-34.
[4] 智海剑，盖钧镒.大豆对SMV数量抗性的表现形式与种质鉴定[J].中国农业科学，2004，37（10）：1422-1427.
[5] 智海剑，盖钧镒，陈应志，等.2002-2004年国家大豆区试品种对大豆花叶病毒抗性的评价[J].大豆科学，2005，24（3）：189-194.
[6] 白丽，李凯，陈应志，等.部分国家和省（市）区试品种对大豆花叶病毒的抗性分析[J].中国油料作物学报，2007，29（1）：86-69.
[7] 杨华，李凯，杨清华，等.国内部分新品种对大豆花叶病毒抗性的鉴定[J].华北农学报，2008，23（S2）：252-255.
[8] 侯文焕，林静，闫龙，等.黄淮海北部地区大豆育成品种（系）对黄淮海主要SMV流行株系的抗性评价[J].植物遗传资源学报，2014，15（4）：888-893.
[9] 吴全安，梁克恭，曹骥.粮食作物种质资源抗病虫鉴定方法[M].北京：中国农业出版社，1991：51-52.
关键词 大豆；新品种（系）；大豆花叶病毒病；抗性鉴定
中图分类号 S656.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）24-0019-02
由大豆花叶病毒（soybean mosaic virus，SMV）引起的大豆花叶病毒病是一种世界性大豆病害，在我国各大豆产区普遍发生，严重影响大豆的产量和品质[1-3]。选育和应用抗病品种是防治大豆花叶病毒病最经济有效的措施[4-6]。该研究对2004—2008年吉林省选育出的30份大豆新品种（系）进行了针对东北大豆花叶病毒主要流行株系的抗性鉴定与评价，明确其抗性表现，以淘汰感病品种，选出抗性品种推广种植，防止病害流行造成损失。
1 材料与方法
1.1 供试品种
2004—2008年参加吉林省大豆新品种抗病性鉴定的30份大豆新品种（系），来自全省各育种单位。
1.2 病毒株系
经过鉴别，寄主的大豆花叶病毒1号和3号株系是东北大豆花叶病毒主要流行株系，其中1号株系是弱毒株系，3号株系是强毒株系。在防蚜网室内通过无病繁毒寄主进行扩繁[7-8]。
1.3 鉴定方法
人工接种鉴定在防蚜网室内进行，参鉴材料按照生育期顺序排列，每品种种植行长5 m，1行区，10 cm等距点播。每10份参鉴材料间设1组抗病和感病对照品种。每份材料连续鉴定2年，以记载的最高发病程度，对鉴定材料进行抗病性评价。
接种前在繁毒株上采集具有典型花叶病毒株系症状的新鲜叶片，剪碎后稍作冷冻，在低温条件下研磨成匀浆。按1∶20质量比加入0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（pH值7.0），配制成病毒接种液。接种前在接种液中添加2% 600目金刚砂并搅拌均匀备用。当待鉴大豆第1片复叶充分展开时，分别用短毛刷人工摩擦接种大豆花叶病毒病1号和3号株系，避免交叉感染，接种后及时喷清水冲刷掉叶片上的病毒汁液。
1.4 病情调查
接种15～20 d后，待参鉴品种（系）普遍发病，症状稳定，病害特征明显，对其进行病情级别调查。病情级别划分采用6级分级标准[9]：0级，无症状反应；1级，轻花叶型，植株生长正常，叶片平展不皱，或有黄绿与暗绿相间的轻花叶；3级，重花叶型，植株生长基本正常，叶片明脉微皱，有明显黄绿相间的斑驳；5级，皱花叶型，植株生长接近正常，不矮化，叶片有波状斑或沿叶缘曲叶或泡状突起，黄化型叶片有黄斑；7级，皱缩型，植株生长不正常，略矮化及黄化，叶片明显皱缩，呈泡状畸形卷曲；9级，矮化型，植株极端矮化，叶片僵化狭窄、畸形卷曲，严重的出现顶端坏死，芽枯或黄萎。
1.5 抗性评价
计算病情指数，采用5级抗性评价标准进行抗性评价，高抗（HR）：0<病情指数≤20；抗病（R）：20<病情指数≤35；中抗（MR）：35<病情指数≤50；感病（S）：50<病情指数≤70；高感（HS）：病情指数>70。病情指数计算公式如下：
2 结果与分析
2.1 参鉴大豆品种的抗性鉴定结果
对30份大豆新品种（系）进行人工摩擦接种大豆花叶病毒1号和3号株系的抗性鉴定结果见表1。可以看出，对1号株系表现高抗的品种有14份，占参鉴总数的46.67%；表现抗病的有4份，占13.33%；表现中抗的有8份，占26.67%；表现感病的有4份，占13.33%；无表现高感品种。对3号株系表现高抗的品种有3份，占参鉴总数的10.00%；表现抗病的有4份，占13.33%；表现中抗的有8份，占26.67%；表现感病的有7份，占23.33%；表现高感的有8份，占26.67%。
2.2 鉴定得到的兼抗品种
鉴定结果表明，对1号和3号株系均表现抗病及以上的品种有7份：平安1006、丰交2004、吉农2002-1、吉農2001-1-4、长C2005-1、公交2002-339-2、公交2001-335-6，占参鉴总数的23.33%。建议在生产上尤其是病毒病高发地区推广种植。
3 结论与讨论
从30份大豆新品种（系）抗花叶病毒病鉴定结果可知：对1号株系表现抗病及以上的品种有18份，占60.00%；对3号株系表现抗病及以上的品种有7份，占23.33%；对1号和3号株系均表现抗病及以上的品种有7份，占23.33%；对1号和3号株系均表现感病的品种有4个，分别是利民98006、九交9895-8、长B2004-88和公交DY2004-6，占13.33%。
大豆花叶病毒病是吉林省大豆生产中的重要病害之一，种植抗病品种是最经济有效的防治措施。从该研究的鉴定结果看，参鉴品种对东北大豆花叶病毒病主要流行株系的抗性整体表现较好，对于3号强毒株系的感病程度重于1号株系，在今后的育种工作中要引起重视。对鉴定出的感病品种要予以淘汰，筛选出的兼抗品种即可用于大豆生产，也可用作抗源材料。
4 参考文献
[1] 吕文清，张明厚，魏培文，等.东北三省大豆花叶病毒（SMV）株系的种类与分布[J].植物病理学报，1985，15（4）：225-228.
[2] 杨崇良，尚佑芬，李长松，等.我国北方地区大豆品种资源对大豆花叶病毒抗性鉴定[J].山东农业科学，1995（5）：22-25.
[3] 刘玉芝，廖林，孙大敏.对大豆花叶病毒（SMV）病抗源的筛选[J].吉林农业科学，1997（1）：30-34.
[4] 智海剑，盖钧镒.大豆对SMV数量抗性的表现形式与种质鉴定[J].中国农业科学，2004，37（10）：1422-1427.
[5] 智海剑，盖钧镒，陈应志，等.2002-2004年国家大豆区试品种对大豆花叶病毒抗性的评价[J].大豆科学，2005，24（3）：189-194.
[6] 白丽，李凯，陈应志，等.部分国家和省（市）区试品种对大豆花叶病毒的抗性分析[J].中国油料作物学报，2007，29（1）：86-69.
[7] 杨华，李凯，杨清华，等.国内部分新品种对大豆花叶病毒抗性的鉴定[J].华北农学报，2008，23（S2）：252-255.
[8] 侯文焕，林静，闫龙，等.黄淮海北部地区大豆育成品种（系）对黄淮海主要SMV流行株系的抗性评价[J].植物遗传资源学报，2014，15（4）：888-893.
[9] 吴全安，梁克恭，曹骥.粮食作物种质资源抗病虫鉴定方法[M].北京：中国农业出版社，1991：51-52.