NOS-NO-NHE1通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用:离体实验

来源 :中华麻醉学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:d2587754
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目的 探讨一氧化氮合酶-一氧化氮-钠氢交换蛋白l(NOS-NO-NHE1)通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 取Langendorff灌流模型制备成功的雄性SD大鼠离体心脏72个,采用随机数字表法,将其分为6组(n=12),假手术组(S组):连续用K-H液灌注180 min;七氟醚组(Sev组):K-H液灌注60 min后,用含2.5%七氟醚的K-H液灌注15 min,再用K-H液灌注105 min;缺血再灌注组(I/R组):K-H液灌注30 min后,停灌30 min,再灌注120 min,制备心肌缺血再灌注损伤模型;七氟醚后处理组(SP组):于再灌注开始即刻用含2.5%七氟醚的K-H液灌注15min,随后再用K-H液灌注105 min;七氟醚后处理+NOS抑制剂左旋-硝基精氨酸甲基酯(L-NAME)组(SPL组):再灌注开始用含浓度为100 μmol/L L-NAME的K-H液灌注60 min,同时在K-H液中通入2.5%七氟醚维持15 min,随后再K-H液灌注60 min; L-NAME组(L组):再灌注开始即刻用含浓度为100μmol/L L-NAME的K-H液灌注60 min,再换用上述单纯K-H液灌注60 min.于再灌注2h时取心肌组织,采用分光光度法检测NO、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)含量和NOS活性,Western blot法测定总NHE1 (t-NHE1)和磷酸化NHE1(p-NHE1)的表达,RT-PCR法测定NHE1 mRNA的表达水平,并测定心肌梗死体积,观察心肌超微结构.结果 与S组比较,I/R组、SP组、SPL组和L组心肌梗死体积增大,心肌NO、NOS和NAD+水平降低,p-NHE1及NHE1 mRNA表达上调(P<0.05),Sev组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与I/R组比较,SP组心肌梗死体积减小,心肌NO、NOS和NAD+水平升高,p-NHE1及NHE1 mRNA表达下调(P<0.05),SPL组和L组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与SP组比较,SPL组和L组心肌梗死体积增大,心肌NO、NOS和NAD+水平降低,p-NHE1及NHE1 mRNA表达上调(P<0.05).SP组心肌病理学损伤较I/R组和SPL组减轻.结论 七氟醚后处理可能通过增强心肌NOS活性,促进NO合成,抑制NHE1功能,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。

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