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目的:克隆小鼠Gtf2h2基因并使其在真核细胞HEK293中稳定表达。方法 :采用小鼠卵母细胞c DNA为模板,经PCR扩增Gtf2h2后,利用新型In-Fusion分子克隆体系将该目的片段克隆至真核表达载体p CMV6-AC-3DDK和p CMV6-ANm Kate中。所得阳性克隆的质粒DNA在经限制性酶切电泳和测序鉴定克隆成功后,转染到HEK293细胞中进行表达。表达效果利用抗DDK和m Kate标签的抗体通过免疫荧光以Western blot的方法进行检测。结果:质粒DNA测序和酶切鉴定证明Gtf2h2基因克隆成功;Western blot检测到GTF2H2-3DDK和GTF2H2-m Kate融合蛋白在转染后的HEK293细胞内的表达;免疫荧光显示融合蛋白在转染后的HEK293细胞核内定位并呈颗粒状分布。结论:成功克隆了小鼠Gtf2h2基因并实现了其在真核细胞HEK293中的稳定表达,为进一步研究其功能和作用机制奠定了基础。