小反刍兽疫病毒F基因真核载体的构建与表达

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根据GenBank中小反刍兽疫病毒(Nigeria75/1株)F基因序列设计了引物,应用RT-PCR方法获得了目的基因,纯化回收后将其连接到克隆载体pMD18-T上。将鉴定与序列测定后的目的基因再克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,经过鉴定,成功构建了含有小反刍兽疫病毒F基因的真核细胞表达载体pEGFP-N1-F。利用脂质体介导阳性pEGFP-N1-F质粒转染了BHK-21细胞。Western-blotting证实,表达的pEGFP-N1-F融合蛋白(90ku)具有免疫活性。
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