SIRPα-GFP真核表达载体构建及其在HEK293T细胞中的表达

来源 :吉林大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：SAGDGJGU

【摘要】

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目的:构建信号调节蛋白α-绿色荧光蛋白(SIRPα-GFP)真核表达载体,转染HEK293T细胞获得稳定表达SIRPα-GFP融合蛋白的细胞系,研究SIRPα-GFP融合蛋白在HEK293T细胞的膜定位。

【作者】

：

王明月王浩王冬梅杨泽斌崔梅英刘宁黄莉莉关新刚

【机构】

：

北华大学医学技术学院肿瘤靶向治疗重点实验室

【出处】

：

吉林大学学报:医学版

【发表日期】

：

2020年5期

【关键词】

：

信号调节蛋白α 绿色荧光蛋白真核表达载体细胞转染 signal regulatory proteinαgreen fluorescent proteineu

【基金项目】

：

吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(20170520140JH,20180101213JC),吉林省教育厅科学技术研究项目资助课题(JJKH20200033KJ),吉林省人社厅人才开发资金项目资助课题(201858),吉林省卫健委卫生计生青年科技骨干培养计划项目资助课题(2017Q040),吉林省吉林市科技局科技创新发展计划项目资助课题(201831729),北华大学青年科研创新团队项目资助课题

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目的:构建信号调节蛋白α-绿色荧光蛋白(SIRPα-GFP)真核表达载体,转染HEK293T细胞获得稳定表达SIRPα-GFP融合蛋白的细胞系,研究SIRPα-GFP融合蛋白在HEK293T细胞的膜定位。方法:将SIRPα质粒和带有GFP的表达载体分别用限制性内切酶MluⅠ和SgfⅠ进行双酶切,将SIRPα基因克隆到pLenti-GFP载体中,构建pLenti-SIRPα-GFP质粒;将pLenti-SIRPα-GFP质粒转化DH5α大肠杆菌感受态细胞,对重组质粒pLenti-SIRPα-GFP进行DNA

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