甲基对硫磷降解菌GFP标记菌株的构建

来源 :应用与环境生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:KenBlove
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用Sau3A I酶切甲基对硫磷降解菌DLL-1总DNA,与BamH I酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连,转化E.coliDH5a,在选择性平板LB(Amp')七从大约1×10^4个菌落筛选到50个含启动子片断的阳性克隆.挑选其中一个阳性克隆,将启动子片断克隆到pIJ2925和pBBR-MCS2上构建成重组质粒pHGFP和广宿主标记载体pBBRGFP.然后将pHGFP载体上的启动子片断克隆到广宿主载体pTR102上,获得第二个广宿主标记载体pTRGFP.将pTRGFP和pBBRG
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