霜天蛾主要变应原的克隆、筛选及序列分析

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoqingwa123456789
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目的对霜天蛾cDNA表达文库进行免疫学筛选,分离和鉴定霜天蛾主要变应原阳性克隆,并测定和分析阳性克隆变应原cDNA序列,为制备重组霜天蛾昆虫变应原疫苗和疫苗的标准化奠定基础。方法构建λZAPⅡ噬菌体霜天蛾表达文库,应用霜天蛾免疫多克隆兔血清和霜天蛾特异性过敏患者血清反复筛选霜天蛾cDNA表达文库,所得的阳性克隆经转化克隆至pBluescript质粒,PCR扩增cDNA片段,并对片段进行序列测定、分析。结果对5×10^4的噬菌体斑进行免疫学筛选,成功获得5个阳性克隆。经PCR扩增并测序分析表明,5
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