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目的：探讨灵芝乙醇提取物（GLEE）对宫颈癌细胞生物学行为和Janus激酶1 （JAK1）/信号传导和转录激活因子3 （STAT3）信号通路的影响，并阐明其可能的作用机制。方法：将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组（给予完全培养液）和低、中及高剂量GLEE组(给予25、50、100 mg·L-1GLEE)。MTT法检测各组细胞增殖抑制率，平板克隆实验检测各组克隆形成率，Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测各组细胞中JAK1和STAT3 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中JAK1、磷酸化JAK1 （p-JAK1）、STAT3、磷酸化STAT3 （p-STAT3）、细胞因子信号传导抑制蛋白3 （SOCS3）和活化STAT蛋白抑制因子1 （PIAS1）蛋白表达水平。结果：与对照组比较，低、中和高剂量GLEE组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率升高（P＜0.05），细胞克隆形成率、迁移细胞数和侵袭细胞数降低（P＜0.05），细胞中JAK1和STAT3 mRNA表达水平降低（P＜0.05），细胞中p-JAK1和p-STAT3蛋白表达水平降低（P＜0.05），细胞中SOCS3和PIAS1蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与低剂量GLEE组比较，中和高剂量GLEE组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率升高（P＜0.05），细胞克隆形成率、迁移细胞数和侵袭细胞数降低（P＜0.05），细胞中JAK1和STAT3 mRNA表达水平降低（P＜0.05），细胞中p-JAK1和p-STAT3蛋白表达水平降低（P＜0.05），细胞中SOCS3和PIAS1蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与中剂量GLEE组比较，高剂量GLEE组宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率升高（P＜0.05），细胞克隆形成率、迁移细胞数和侵袭细胞数降低（P＜0.05），细胞中JAK1和STAT3 mRNA表达水平降低（P＜0.05），细胞中p-JAK1和p-STAT3蛋白表达水平降低（P＜0.05），细胞中SOCS3和PIAS1蛋白表达水平升高（P＜0.05）。结论：GLEE对宫颈癌HeLa细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭均有一定的抑制作用，其可能是通过上调细胞中SOCS3及PIAS1表达水平，进而影响JAK1/STAT3信号通路发挥作用。