玻璃表面cDNA微阵列的制备与优化

来源 :生物物理学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxy20009

【摘要】

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对DNA进行荧光标记,确定简单、实用和有效的固定化方法和筛选出合适的杂交条件,是制备DNA阵列的几个关键步骤.在PCR的过程对cDNA进行标记,不同的掺入比例可以得到不同的标记

【作者】

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谢文章孙宝全马清梅程京

【机构】

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清华大学生物科学与技术系,清华大学化学系

【出处】

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生物物理学报

【发表日期】

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2002年1期

【关键词】

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玻璃表面 CDNA微阵列制备优化 DNA芯片固定化荧光标记 UV交联杂交 DNA chip UV crosslinking Fluorescenc

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对DNA进行荧光标记,确定简单、实用和有效的固定化方法和筛选出合适的杂交条件,是制备DNA阵列的几个关键步骤.在PCR的过程对cDNA进行标记,不同的掺入比例可以得到不同的标记效率,Cye dye-dCTP/dCTP的比例在1:3～1:4较好.将DNA固定到玻璃表面,poly-l-lysine方法是一种不需要对DNA进行修饰的有效方法.其中UV照射的能量以600mJ效果最好;水合(rehydrate)温浴过程的温度以65°C最佳.在固化过程中所用探针的浓度0.2-0.5mg/ml对杂交信号影响不

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