【摘 要】
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目的构建及鉴定Livin基因siRNA慢病毒表达载体并观察其对喉癌细胞HEP-2增殖的影响。方法从基因库获得Livin基因序列,设计3段siRNA序列;经MluⅠ和ClaⅠ双酶切后克隆入慢病毒表
【机 构】
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川北医学院第二临床医学院耳鼻咽喉科,川北医学院病理学教研室
【基金项目】
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四川省科技厅重点研发项目(2018FZ0116), 四川省教育厅自然科学重点项目(18ZA0203), 南充市科技局应用技术研究与开发基金项目(16YFZJ0021), 川北医学院博士科研启动基金资助项目(CBY13-QD-08)
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目的构建及鉴定Livin基因siRNA慢病毒表达载体并观察其对喉癌细胞HEP-2增殖的影响。方法从基因库获得Livin基因序列,设计3段siRNA序列;经MluⅠ和ClaⅠ双酶切后克隆入慢病毒表达载体p Len OR-THM,构建p Len OR-THMLivin-siRNA重组质粒,将其转化感受态细菌DH5α,对阳性克隆进行筛选后,用EcoRⅠ和XbaⅠ双酶切及测序鉴定正确后用脂质体转染293T细胞包装病毒颗粒,感染293T细胞及HEP-2细胞,用荧光定量PCR检测其对HEP-2增殖的影响。结果慢病毒表
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