【摘 要】
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为了筛选得到畜禽养殖用途的益生乳酸菌,试验以河南省驻马店市农户散养鸡肠道黏膜洗脱物为样品,用Ca-MRS固体产酸鉴别培养基分离培养益生乳酸菌,纯化后利用耐酸性、耐胆盐性检测初步筛选潜在益生效果的乳酸菌;对筛选得到的乳酸菌进行抑菌能力检测及模拟胃液耐受能力检测;再通过菌落形态、革兰氏染色和PCR等方法鉴定分离菌株;最后利用单因素试验和响应面试验优化其发酵条件,筛选出适宜分离菌株发酵的最优工艺。结果表
【基金项目】
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河南省重大科技专项（创新示范专项）（191110110600）； 河南省自然科学基金项目（212300410203）； 黄淮学院高级人才引进项目（1000.12.01.1678）;黄淮学院国家级项目培育基金项目（1000.11.07.1678.1002）； 黄淮学院2020年横向科研项目（2020
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为了筛选得到畜禽养殖用途的益生乳酸菌,试验以河南省驻马店市农户散养鸡肠道黏膜洗脱物为样品,用Ca-MRS固体产酸鉴别培养基分离培养益生乳酸菌,纯化后利用耐酸性、耐胆盐性检测初步筛选潜在益生效果的乳酸菌;对筛选得到的乳酸菌进行抑菌能力检测及模拟胃液耐受能力检测;再通过菌落形态、革兰氏染色和PCR等方法鉴定分离菌株;最后利用单因素试验和响应面试验优化其发酵条件,筛选出适宜分离菌株发酵的最优工艺。结果表明:由Ca-MRS固体培养基筛选到鸡肠源产酸菌株75株,分别编号为SI01～25、CC01～25和DD01～25。依据各菌株的水解圈半径大小,最终选出编号为SI01（5.5 mm）、SI03（6.0 mm）、CC02（5.0 mm）、CC04（6.2 mm）、DD03（5.7 mm）和DD05（5.0 mm）的6株产酸特性好的乳酸菌菌株,对这6株分离菌株进行耐酸性、耐胆盐性检测,筛选出3株体外益生性状优良的菌株,分别为SI03、CC04和DD05,且均表现出了良好的抑菌效果。3株分离菌株在模拟胃液中均有一定的耐受能力,其中CC04菌株在模拟胃液中处理3 h后,菌落数量明显增加。PCR鉴定发现SI03和CC04菌株是清酒乳杆菌,DD05菌株是戊糖片球菌;以CC04菌株为代表进行发酵条件优化试验,最优发酵条件为温度37℃,碳源为30 g/L葡萄糖,初始pH值为6.0,氮源为25 g/L酵母粉。说明试验筛选获得3株具有潜在益生效果的乳酸菌,并以CC04为例获得最佳发酵条件。
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