16S rDNA用作荧光定量PCR靶基因快速检测铜绿假单胞菌

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Phoenix164

【摘要】

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对20余种细菌16S rDNAs进行多序列比对与进化树分析，设计铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）荧光定量PCR（fluorescence quantitative PCR，FQ-PCR）特异性引物。提取PA基因组DNA

【作者】

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薛利军王永智任浩童一民赵平朱诗应戚中田

【机构】

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第二军医大学微生物学教研室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2006年5期

【关键词】

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铜绿假单胞菌 16S RDNA 荧光定量PCR 检测 Pseudomonas aeruginosa 16S rDNA fluorescence quanti

【基金项目】

：

军队“十一五”医学专项课题资助（No.062026）.

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对20余种细菌16S rDNAs进行多序列比对与进化树分析，设计铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）荧光定量PCR（fluorescence quantitative PCR，FQ-PCR）特异性引物。提取PA基因组DNA，以特异性引物扩增16S rDNA靶片段，并构建重组质粒pMDT-Pfr。将梯度稀释的pMDT-Pfr质粒作为模板，用于建立定量标准曲线。以SYBR Green Ⅰ荧光染料建立20μL反应体系，对不同浓度的PADNA样品进行FO-PCR检测。同时，以金黄色葡

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