【摘 要】
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[目的]构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础.[方法]利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基
【机 构】
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吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心
【出 处】
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西北农林科技大学学报（自然科学版）
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[目的]构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础.[方法]利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL KGF2,采用冻融法将质粒pOP-OL-KGF2转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,采用PCR检测筛选转基因红花阳性植株,SDS-PAGE检测Oleosin-KGF2融合蛋白的表达情况.[结果]成功构建了植物特异表达载体pOP OL-KGF2,转染后共获得了12株转基因红花植株,其中2株鉴定为阳性,阳性率为17％,对转化植株进行DNA水平检测和蛋白水平检测,可知KGF2基因已经整合进红花基因组中,且有所表达.[结论]成功获得转KGF2基因的红花株系.
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