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目的检测全国19家医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的TEM型ESBLs。方法收集2004~2005年全国19家医院对头孢他啶耐药的大肠埃希菌98株和肺炎克雷伯菌109株,琼脂稀释法测定菌株MICs,PCR扩增blaTEM基因。扩增阳性菌株进行接合实验,测定接合子MICs并PCR扩增blaTEM基因。扩增阳性的菌株和接合子以等电聚焦电泳(IEF)检测其β-内酰胺酶等电点。对具有典型TEM型ESBLs表型的菌株进行测序和变性高效液相色谱(DHPLC)分析。进一步收集检出突变菌株的宿主患者及其所在病房分离的对头孢