魏氏梭菌贵州分离株α-毒素基因的克隆与表达

来源 :山地农业生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：algenesis

【摘要】

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提取已鉴定的A型魏氏梭菌Clostridium welchii贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收分子长2～4kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coli JM109,通过Amp抗药性和

【作者】

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王开功周碧君李海阔文明

【机构】

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贵州大学

【出处】

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山地农业生物学报

【发表日期】

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2003年6期

【关键词】

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克隆基因表达重组魏氏梭菌 α-毒素基因肠毒血症坏死性肠炎 Clostridium welchii α-toxin gene cloning gene

【基金项目】

：

贵州省科技厅科研项目

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提取已鉴定的A型魏氏梭菌Clostridium welchii贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收分子长2～4kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coli JM109,通过Amp抗药性和显色反应的选择,再提取阳性重组细菌质粒进行探针检测、酶切分析和PCR鉴定,筛选出含魏氏梭菌α-毒素基因的重组大肠杆菌;经溶血与溶血抑制试验及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实,重组E.coli的表达产物符合α-毒素的生物学特性.

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