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用基因融合方式,以嗜水气单胞菌基因组DNA为模板,设计引物通过聚合酶链式反应(PCR)把去除部分毒性活性编码区的细胞毒肠毒素基因(act)与去除信号肽的外膜蛋白基因(OmpTS)连接一起,两基因之间插入一个linker(Gly4Ser)3经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,得到2.1kb的双基因融合片段,克隆于表达质粒pQE-30中,构建了双基因重组表达载体pQE30/act-GS-ompTS,转化大肠杆菌M15(pREP4),经IPTG诱导,表达出预期大小(81.0kD)的融合蛋白Acl-GS-OmpTS,