【摘 要】
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目的 探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法 体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组：NC（空白）组、si-NC（转染si-NC）组、si-Circ-ZNF609（转染si-Circ-ZNF609）组、miR-NC（转染miR-NC）组、miR-224-5p（转染miR-224-5p）组、si-Circ-Z
【基金项目】
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河南省自然科学基金（182300410376）；
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目的 探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法 体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组：NC（空白）组、si-NC（转染si-NC）组、si-Circ-ZNF609（转染si-Circ-ZNF609）组、miR-NC（转染miR-NC）组、miR-224-5p（转染miR-224-5p）组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-NC（同时转染si-CircZNF609和anti-miR-NC）组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-224-5p（同时转染si-CircZNF609和anti-miR-224-5p）组；采用实时荧光（qRT）-聚合酶链反应（PCR）检测Circ-ZNF609、miR-224-5p表达量；采用Western印迹检测细胞周期素蛋白（Cyclin）D1、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Cleaved-caspase）-3、β-catenin蛋白表达；采用噻唑蓝（MTT）法和流式细胞仪分别检测细胞活力、细胞周期和凋亡率；双荧光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。结果 与正常食管内皮细胞NEC比较，食管癌细胞Eca-109、KYSE30、KYSE-450中Circ-ZNF609表达水平明显升高，miR-224-5p表达水平明显降低（P＜0.05）;与si-NC组比较，si-Circ-ZNF609组细胞活力与S期细胞比例明显降低（P＜0.05）,G2/M期细胞明显比例升高（P＜0.05）,CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低，凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加（均P＜0.05）;与miR-NC组比较，miR-224-5p组细胞活力与S期细胞比例明显降低，G2/M期细胞比例明显升高，CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低，凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白产生明显增加（P＜0.05）;Circ-ZNF609可靶向调控miR-224-5p;抑制miR-224-5p表达可逆转Circ-ZNF609沉默对食管癌细胞生物学行为的作用。结论 干扰Circ-ZNF609能够通过促进miR-224-5p表达而调控食管癌细胞生物学特性，此影响可能涉及Wnt/β-catenin信号通路的失活。
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