用种特异性聚合酶链反应检测普氏立克次体的研究

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目的建立特异敏感的快速检验普氏立克次体PCR检测方法,并能与莫氏立克次体相区分.方法采用种特异性巢式PCR方法,进行实验室模拟检测.结果以普氏立克次体的rpa14/16基因为靶标设计了两对引物;该引物特异性实验表明仅普氏立克次体特异性片段可以扩增出来,其余相关立克次体均扩增不出,尤其可鉴别其同群的莫氏立克次体;敏感性测试结果可检测出63fg的普氏立克次体DNA,可检测出0.05个鸡胚半数感染量(CEID50)的立克次体;对人工模拟的小鼠脏器研磨液、血液标本检测发现该法在血液标本中的检测敏感性下降3~4个滴
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