【摘 要】
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目的：对传统的胶原酶灌流法加以改进,以节约分离肝细胞的实验时间和成本.方法：采用离体法,分3次从肝窦灌注含有肝素钠的D-Hanks液共150 mL;用30 mL终浓度为0.04%的胶原酶液（Ⅰ：Ⅳ
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目的：对传统的胶原酶灌流法加以改进,以节约分离肝细胞的实验时间和成本.方法：采用离体法,分3次从肝窦灌注含有肝素钠的D-Hanks液共150 mL;用30 mL终浓度为0.04%的胶原酶液（Ⅰ：Ⅳ=1：4）灌洗2 min;去除表皮等结缔组织,过筛、离心洗涤即得肝细胞.结果：平均1 g大鼠肝脏能获取7×10^6～8×10^6个肝细胞,细胞存活率为96.3%.结论：简易胶原酶灌流法的胶原酶用量是Seglen二步灌注法用量的1/16,是半原位的1/4;灌流时间约5 min,是Seglen二步
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