【摘 要】
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目的观察丙酮酸乙酯(EP)对SD大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧(SIR)损伤的影响,并探讨内质网应激(ERS)在这一过程中的作用。方法乳鼠心肌细胞经EP(5或10 mmol/L)处理2 h后,接受模拟缺氧复氧(SIR)损伤(缺氧2 h,复氧4 h),噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞活力,专用试剂盒检测细胞培养液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄
【机 构】
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目的观察丙酮酸乙酯(EP)对SD大鼠乳鼠心肌细胞缺氧复氧(SIR)损伤的影响,并探讨内质网应激(ERS)在这一过程中的作用。
方法乳鼠心肌细胞经EP(5或10 mmol/L)处理2 h后,接受模拟缺氧复氧(SIR)损伤(缺氧2 h,复氧4 h),噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞活力,专用试剂盒检测细胞培养液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达变化。随后,EP处理时加入ERS激动剂毒胡萝卜素(THA),观察其对EP抗心肌细胞SIR损伤的影响。
结果5、10 mmol/L EP均可以显著升高心肌细胞SIR后细胞活力(分别增加到0.424±0.016和0.517±0.020),降低培养液中MDA水平[分别降低到(16.17±1.75)和(11.45±1.20)μmol/L],但SOD水平升高[分别升高到(58.61±4.70)和(72.60±4.35)U/L,与SIR组比较,P<0.05]。SIR后细胞中GRP78和CHOP表达水平升高(与对照组比较,P< 0.05),EP还可以逆转SIR上调的GRP78和CHOP表达水平(与SIR组比较,P<0.05)。进一步研究结果显示,ERS激动剂THA可以逆转EP对心肌细胞的保护作用,降低心肌细胞活力,增加GRP78和CHOP表达水平(与EP+ SIR组比较,P< 0.05)。
结论EP可显著减轻乳鼠心肌细胞的SIR损伤,其机制与抑制异常激活的ERS反应有关。
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