目的 观察氟对体外培养人成骨肉瘤细胞内微小染色体维系蛋白(minichromosone maintenance,MCM)3和成骨相关基因表达的影响,探讨MCM3基因能否作为诊断及监测成骨细胞染氟过量的生物学标志.方法 采用McCoy5A培养液,体外培养人成骨肉瘤细胞(Saos-2).按染氟(NaF)剂量将骨肉瘤细胞分为O(对照)、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000 mg/L组,染氟培养24 h后收集细胞,实时荧光定量(real-time.RT-PCR)PCR测定成骨细胞MCM3和骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OP)3种成骨相关基因mRNA的表达,化学比色法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,用双标准曲线法计算基因表达的相对比值.结果 成骨肉瘤细胞MCM3 mRNA表达在0.625、1.250、2.500、5.000、20.000、40.000 mg/L组(0.059±0.003、0.027±0.001、0.272±0.004、0.115±0.002、0.137±0.004、0.754±0.002)低于对照组(1.000±0.020,P均>0.05),但10.000 mg/L组(21.300±1.200)显著高于对照组(P<0.01),也高于其他染氟组(P均<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=305.842,P<0.01).BSPmRNA表达在0.625、1.250、2.500、5.000、10.000 mg/L组(71.80±3.60、133.00±7.20、85.50±0.60、80.90±1.20、304.00±21.00)显著高于对照组(1.00±0.04,P均<0.01),尤其10.000 mg/L组明显高于其他染氟组(P均<0.01),组问比较差异有统计学意义(F=159.531,P<0.01).OC mRNA表达在0.625、1.250、2.500、5.000 mg/L组(110.00±12.00、143.00±2.10、90.60±4.10、23.70±1.20)高于对照组(1.00±0.01,P均<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=158.734,P<0.01).OP mRNA表达,在0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000 mg/L组(167.00±11.20、111.00±12.10、72.50±3.50、134.00±14.00、42.30±2.40、45.20±3.30)高于对照组(1.00±0.04,P均<0.05或<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=60.226,P<0.01).ALP的活性虽然在0.625～40.000mg/L组(6.0±0.4、5.8±0.1、5.7±0.4、7.7±1.1、19.2±2.4、8.5±3.0、18.1±4.2)与对照组(4.2±1.2)比较是增加的,但仅10.000、40.000 mg/L组明显高于对照组和其他染氟组(P均<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=7.806,P<0.01).结论 MCM3表达不规律,不适合作为诊断及监测成骨细胞在过量氟作用下的生物标志;氟可能通过影响各成骨相关基因的表达而促进成骨分化。
过量氟暴露对成骨细胞微小染色体维系蛋白3及成骨相关基因表达的影响
【摘 要】
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目的 观察氟对体外培养人成骨肉瘤细胞内微小染色体维系蛋白(minichromosone maintenance,MCM)3和成骨相关基因表达的影响,探讨MCM3基因能否作为诊断及监测成骨细胞染氟过量的生物学标志.方法 采用McCoy5A培养液,体外培养人成骨肉瘤细胞(Saos-2).按染氟(NaF)剂量将骨肉瘤细胞分为O(对照)、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.
【机 构】
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新疆医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室,中国疾病预防控制中心教育培训处,新疆医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室,新疆医科大学公共卫生学院基础医学院组织胚胎学教研室
【出 处】
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中华地方病学杂志
【发表日期】
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2010年29期
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