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弓形虫酵母表达质粒pPIC9K-GRA1的构建及鉴定

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：pdswzjhxr

【摘 要】

：

目的构建弓形虫致密颗粒抗原-1（GRA1）的酵母表达质粒,为进一步研究GRA1蛋白功能奠定基础。方法PCR扩增编码GRA1目的基因,用EcoRⅠ/NotⅠ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进

【作 者】

：

谢荣华 吴翔 舒衡平 蒋立平 范久波 谭逵 张琼 

【机 构】

：

中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室,湖南环境生物职业技术学院

【出 处】

：

中国病原生物学杂志

【发表日期】

：

2007年2期

【关键词】

：

刚地弓形虫 GRA1 酵母表达质粒 构建 鉴定 Toxoplasma gondii   GRA1   Pichia pastoris expression pl 

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（No.30371260）,湖南省卫生厅资助项目（No.C2006-033）,湖南环境生物职业技术学院院长基金项目（No.Z07-09）.

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目的构建弓形虫致密颗粒抗原-1（GRA1）的酵母表达质粒,为进一步研究GRA1蛋白功能奠定基础。方法PCR扩增编码GRA1目的基因,用EcoRⅠ/NotⅠ分别对扩增产物和酵母表达质粒pPIC9K进行双酶切,将GRA1定向克隆到pPIC9K的EcoRⅠ/NotⅠ位点,对重组质粒进行PCR,双酶切初步鉴定后做序列测定。结果特异扩增出预期的GRA1片段,大小为573bp,扩增产物经双酶切后成功连接到pPIC9K中,经PCR,双酶切及序列测定证明重组质粒中含有GRA1读框。结论成功构建弓形虫GRA1酵母真核表达质

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