论文部分内容阅读
目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过抑制转录活化因子(Stat3)活性下调胃癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的分子机制。方法 采用Westem blot法检测AGS胃癌细胞分别在50 μg/L IL-6加0、5、10、25、50 μmol/L EGCG作用下，VEGF、总Stat3(tStat3)和活化Stat3 (pStat3)的表达情况；检测Stat3信号通路抑制剂对IL-6诱导的VEGF蛋白表达水平的影响。酶联免疫吸附法检测肿瘤细胞培养液中VEGF蛋白水平。RT-PCR法检测胃癌细胞VEGF mRNA表达水平。制备细胞核提取液,Western blot法检测肿瘤细胞核内pStat3表达;同时采用染色体免疫沉淀方法检测Stat3与DNA的结合活性。结果 IL-6可以诱导AGS胃癌细胞VEGF表达，与未添加组比较，添加IL-6组胃癌细胞VEGF蛋白表达、分泌和mRNA表达分别增加了2.4、2.8和3.1倍(均P＜0.01)；EGCG剂量依赖性地抑制IL-6诱导的胃癌细胞VEGF蛋白表达、分泌和VEGF mRNA表达(P＜0.05)。EGCG和Stat3信号通路抑制剂AG490可以显著抑制IL-6诱导的VEGF表达（P＜0.01）；EGCG处理的胃癌细胞中IL-6诱导的pStat3表达剂量依赖性地减少(P＜0.05)，但EGCG不影响IL-6诱导的tStat3表达（P＞0.05）；同时，EGCG可以直接抑制胃癌细胞自身和IL-6诱导的Stat3核转位和Stat3-DNA结合活性(P＜0.05)。结论 EGCG通过抑制Stat3活性，从而下调胃癌细胞VEGF表达。