类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物后体内外标记示踪及神经功能恢复检测

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目的 将类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物内后观察体外培养下细胞存活情况及体内桥接坐骨神经缺损后细胞存活情况及对神经功能恢复的影响.方法通过Dezawa改良法诱导的类许旺细胞经Hochest 33342标记以107/ml显微注入经化学萃取的神经桥接物内,分别体外培养0、5、10、15、20、30 d,苏木精-伊红染色及荧光显微镜观察细胞在桥接物内的存活情况.同时将该神经桥接物桥接2 cm长的坐骨神经缺损模型,分别于5、10、15、20、30、40 d取材,观察细胞在桥接物内的存活情况、再生轴突的生长速度及再生轴突有髓纤维密度;于第30、50、70 d进行神经电生理检测;于第40、60、80 d进行坐骨神经功能指数测定.同时将无细胞的单纯神经桥接物桥接坐骨神经缺损及自体坐骨神经切断后原位缝合分别作为对照.结果类许旺细胞在体内外条件下均能在化学萃取后的去细胞神经桥接物中存活.体内环境可能更有利于类许旺细胞的增殖.种植类许旺细胞的实验组各测定指标明显优于无细胞桥接对照组(P<0.05或P<0.01),实验组与自体神经对照组各指标近似(P>0.05).结论类许旺细胞种植入去细胞神经桥接物后在体内外环境均能存活;种入类许旺细胞的去细胞神经桥接物桥接神经缺损可达到近似自体神经移植桥接的效果。

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