目的：构建由人Egr-1放射诱导性启动子调控的自杀基因靶向性真核表达载体,并转染人鼻咽癌细胞株CNE,比较射线诱导前后自杀基因在鼻咽癌细胞中的表达的情况,为临床肿瘤放射基因治疗奠定实验基础。 方法：根据Genebank数据库提供的人Egr-1启动子基因序列,设计一对引物克隆人Egr-1启动子,采用PCR、酶切、连接等分子生物学技术,构建pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组质粒表达载体,并利用脂质体转染的方法转染人CNE细胞株,经G418筛选后获得阳性细胞克隆,RT-PCR分析鉴定不同的放射剂量0、5、10、15、20Gy五种剂量进行6MVX线照射对CD基因的表达的影响。 结果：经PCR、酶切、测序等证实了pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组靶向性质粒表达载体构建成功,G418筛选所得到的CNE细胞阳性克隆经不同放射剂量的诱导后,RT-PCR结果显示体外放射线照射可显著提高CNE细胞中CDmRNA的表达水平.而在10Gy及15Gy组CDmRNA的表达水平明显增高,尤以15Gy组CDmRNA的表达水平最高,而在20Gy组CDmRNA的表达水平反而下降。 结论：pcDNA3.1(+)-Egr-1-CD重组质粒表达载体构建成功,并成功转染入鼻咽癌细胞株,建立了基因表达与放射的剂量效应关系,为后续的临床应用研究奠定基础。