【摘 要】
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目的:观察足叶乙甙(VP16)诱导HL-60细胞survivin mRNA的表达水平.方法:取对数生长期的HL-60细胞,调整细胞浓度为1.8×105/mL,接种于灭菌24孔培养板,每孔1.8 mL,加入不同浓度
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目的:观察足叶乙甙(VP16)诱导HL-60细胞survivin mRNA的表达水平.方法:取对数生长期的HL-60细胞,调整细胞浓度为1.8×105/mL,接种于灭菌24孔培养板,每孔1.8 mL,加入不同浓度的VP16 200 μL,使其终浓度分别为1、5、10、20 μg/mL,同时设置空白对照组,加入200 μL RPMI-1640液.每组平行4个复孔.培养48 h后进行相关指标检测.采用MTT法检测细胞增殖抑制作用,原位末端标记(Tunel)法检测细胞凋亡指数(AI),RT-PCR半定量测定细胞中survivin mRNA的表达.结果:VP16各浓度对HL-60细胞均有抑制作用,抑制程度随着浓度的增大和作用时间的延长而增加,呈明显的时间-剂量依赖性.DAB染色后于倒置显微镜下观察,VP16各浓度组细胞AI均明显高于空白对照组(P＜0.01),AI呈剂量依赖性.RT-PCR结果显示,各浓度组VP16作用48 h后,survivinmRNA的表达水平明显下降,条带变细,亮度变暗.尤其20 μg/mL组变化明显.而空白对照组survivin mRNA的表达水平无明显变化.结论:VP16诱导HL-60细胞凋亡可能与其抑制survivin mRNA的表达有关.
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