【摘 要】
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目的 探讨不同 pH值条件对肝细胞培养时一氧化氮 (NO)产生的影响及对肝细胞的损伤程度。方法 本研究首先将成年健康大鼠经静脉注射灭活有毒棒状杆菌 ,感染 4天后处死动物取
【机 构】
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上海市中西医结合医院普外科,上海市中西医结合医院神经内科,Department of General Surgery University Clinicat Safranberg!Unive
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目的 探讨不同 pH值条件对肝细胞培养时一氧化氮 (NO)产生的影响及对肝细胞的损伤程度。方法 本研究首先将成年健康大鼠经静脉注射灭活有毒棒状杆菌 ,感染 4天后处死动物取肝脏作肝细胞分离并培养 ,2 4h后在培养液中加入L 精氨酸 ,同时将培养液调节成pH7.0、pH7.4及 pH7.8三组 ,又在每一 pH处理组中分出对照组 (CP组 )、大肠杆菌内毒素刺激组 (CP +LPS组 )及单甲基精氨酸抑制组 (CP +LPS +NMA组 ) ,继续培养 2 4h。结果 CP组产生约 10 0 μmol/L的NO ,pH值的改变对其无明显影响。在CP +LPS处理的肝细胞 ,pH7.4及 pH7.8组的值分别为 (2 39.3± 18) μmol/L及(2 2 8.4± 14.7) μmol/L ,显著高于pH7.0组 ((16 3.2± 5 .7) μmol/L ,P <0 .0 1)。加用NMA后 ,一氧化氮的产生明显减少 ,但三组间差异无显著性。加用LPS后肝细胞的损伤加重 ,pH7.0组LDH及ALT值显著高于 pH7.4及pH7.8组。当应用NMA抑制NO生成时 ,培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)和丙氨酸转氨酶 (ALT)值显著升高 ,并以酸性组为明显。在CP组肝细胞 ,iNOS的产生量在三种不同 pH处理间无明显差别 ,加用LPS刺激后 ,iNOS的合成明显增加 ,而且酸性或碱性情况下iNOS的合成较 pH7.4时更高。结论 对处于炎症状态的肝细胞 ,酸性环境会抑制一氧化氮合成 ,较中性
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