【摘 要】
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目的 研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7(CASC7)对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制.方法 膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组.Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体.对照组正常培养,实验组给予48μmol·L-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再
【机 构】
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丽水市人民医院 泌尿外科,浙江 丽水323000
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目的 研究硫利达嗪调控长链非编码RNA癌症易感候选基因7(CASC7)对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制.方法 膀胱癌T24细胞分成对照组、Vector组、CASC7组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组.Vector组转染阴性对照载体、CASC7组转染CASC7过表达载体.对照组正常培养,实验组给予48μmol·L-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-NC组先转染shRNA control再给予48μmol·L-1的硫利达嗪处理,实验组+sh-CASC7组先转染CASC7 shRNA再给予48μmol·L-1的硫利达嗪处理.转染前将对数期的T24细胞调整浓度为每毫升5×104个,接种于无菌细胞培养板,细胞融合度至75％～85％时,使用0.5％胰蛋白酶消化,用Lipofectamine?2000转染试剂将阴性对照载体、CASC7过表达载体、shRNA control、CASC7 shRNA转染进细胞.以实时定量反转录聚合酶链反应检测CASC7表达水平;以细胞计数试剂盒-8实验检测细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡情况;以分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性.结果 对照组、Vector组、CASC7组CASC7基因表达水平分别为1.00±0.12,1.01±0.08和2.24±0.14;细胞存活率分别为(100.00±6.36)％,(99.89±9.27)％和(64.12±4.24)％;细胞凋亡率分别为(5.10±0.33)％,(4.90±0.58)％和(17.47±1.25)％;Caspase-3活性分别为1.00±0.09,0.97±0.06和1.99±0.17.上述指标,CASC7组与对照组、Vector组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).对照组、实验组、实验组+sh-NC组、实验组+sh-CASC7组T24细胞中CASC7基因表达水平分别为1.00±0.09,1.83±0.11,1.75±0.17和0.92±0.07;细胞存活率分别为(100.00±6.60)％,(53.08±4.67)％,(50.82±6.00)％ 和(75.98±10.96)％;细胞凋亡率分别为(4.99±0.40)％,(20.71±1.30)％,(21.47±1.71)％和(9.91±1.12)％;Caspase-3活性分别为1.00±0.08,2.58±0.18,2.51±0.22和1.58±0.13.上述指标,实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组+sh-CASC7组与实验组+sh-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 硫利达嗪通过上调CASC7抑制膀胱癌细胞增殖并促进细胞凋亡.
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