论文部分内容阅读
[目的]探索miR-140对早期骨关节炎(0A)软骨细胞衰老的调控作用及机制.[方法]收集人膝关节正常、早期OA(E-OA)和中晚期OA (ML-OA)软骨组织,酶消化法获得相应组别软骨细胞.首先,PCR检测各组miR-140水平,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-βGal)试剂盒分析SA-βGal活性,PCR和免疫细胞化学法检测衰老分子p16INK4a、p21和p53的表达.然后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr和miR-140 mimic组并给予相应干预,检测并比较各组miR-140水平.最后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr+ IL-1β和miR-140 mimic+ IL-1β组并给予相应干预,分析和比较各组细胞周期、SA-βGal活性及衰老分子表达情况.[结果]正常、E-OA和ML-OA三组间miR-140水平、G0/G1期细胞比例(G0/G1％)、SA-βGal活性及衰老分子水平比较差异均有统计学意义(P＜0.05),miR-140水平与OA分级呈显著负相关(P＜0.05),而G0/G1％、SA-βGal活性及衰老分子阳性率与OA分级呈显著正相关(P＜0.05).在E-OA软骨细胞中,与空白组相比,IL-1β组miR-140水平显著降低(P＜0.05),miR-Scr组无明显改变(P＞0.05),miR-140 mimic组显著升高(P＜0.05).在E-OA软骨细胞中,IL-1β组G0/G1％、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著高于空白组(P＜0.05)、与miR-Scr+ IL-1β组相比差异无统计学意义(P＞0.05),miR-140+ IL-1β组G0/G1％、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著低于miR-Scr+ IL-1β组(P＜0.05).[结论]软骨细胞衰老与OA发生发展密切相关,上调miR-140表达可有效抑制E-OA软骨细胞衰老,是延缓E-OA进展的潜在治疗策略.