稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立

来源 :东北农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wymanszeto
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根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对%RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体plRES2-EGFP双酶切后进行连接构建plRES2-EGFP-T7RNA质粒。再将构建正确的plRES2-EGFP—T7RNA质粒经用脂质体法转染猪睾丸细胞,通过G418筛选和单细胞克隆化,同时构建pET-32a—RED原核表达质粒载体’用其检测T7启动子控制下的红色荧光蛋白的表达。结果表明,建立的ST/T7RNA细胞系经20次传代仍然能稳定表
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