【摘 要】
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以2株犬瘟热病毒(CDV)特异性单克隆抗体2H11和1G7为基础建立了检测CDV的单抗夹心ELISA方法。用单抗2H11作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的单抗1G7为检测抗体,通过方
【机 构】
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江苏畜牧兽医职业技术学院,江苏省东海县畜牧兽医站
【基金项目】
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江苏省自然科学基金资助项目(BK2009738), 江苏省科技支撑计划项目(BE2010381)
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以2株犬瘟热病毒(CDV)特异性单克隆抗体2H11和1G7为基础建立了检测CDV的单抗夹心ELISA方法。用单抗2H11作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的单抗1G7为检测抗体,通过方阵试验确定2H11和1G7-HRP的最佳工作浓度分别为200和475ng.mL-1。建立的单抗夹心ELISA方法具有良好的特异性,与纯化的犬细小病毒(CPV)无交叉反应,对纯化的CDV最小检出浓度为0.01μg.mL-1。采集经CDV抗原快速检测试纸条检测为阳性的40份疑似感染犬样品和检测为阴性的18份对照犬样品,分别用单抗夹心ELISA法和套式PCR法(N-PCR)进行同步检测,结果表明:单抗夹心ELISA法敏感性接近于N-PCR法,两种方法的符合率为85%。
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